生物芯片法檢測沙眼衣原體抗體
[檢測方法] 生物芯片法
[方法學原理] 以微孔濾膜為載體,利用微陣列技術將純化的沙眼衣原體(CT)特異性蛋白固定于同一膜片上,并利用微孔濾膜的滲濾、濃縮、凝集作用,使抗原抗體反應在固相膜上快速進行,再以免疫金作為標記物直接在膜上顯色。顯色后的芯片放人芯片識別儀,在專用軟件的支持下對不同點陣的灰度值進行分析。
[標本準備] 取新鮮末梢血或靜脈血,分離血清后,如果試驗在采血后24h不能進行,應將其在-20℃環境中保存。檢測時,應使樣本恢復至室溫。
[試劑]
1.蛋白芯片
2.試劑A(洗滌液)
3.試劑B(金溶膠試劑)
[儀器] 蛋白芯片檢測系統
[檢測步驟]
1.在芯片上標記樣品編號。
2.在芯片盒窗口內滴加4滴試劑A,使膜表面完全浸濕。
3.待完全滲入后,室溫環境中放置lmin,加待檢血清100u1。
4.待血清完全滲入后,及時滴加6滴試劑B。
5.待試劑B完全滲入后,滴加6滴試劑A。
6.反應完畢后30rain內,將芯片放人餅片閱讀系統進行分析。
[結果判斷]
檢測結果1:CT陰性,提示沒有被感染。
檢測結果2:CT陽性,提示被CT感染。
[正常參考值] 沙眼衣原體抗體陰性
[注意事項]
1.從2~8℃環境中取出的芯片須在室溫環境中平衡至少10min后方可使用。
2.采取血樣時患者無須禁食。
3.新鮮血樣在2~8℃環境下存放不要超過48h;長期保存的樣本應在-20℃以下環境中凍存,避免反復凍融。
4.芯片反應窗口中的膜不能損傷或受潮:
l芯片應在有效期內使用。若陽性控制點不顯色說明芯片已失效,換新的芯片重做。
6.殘余的標本與使用過的芯片盒按生物危險品進行消毒處理。
7.操作時要戴手套,檢測完畢徹底洗手。
8.如不慎讓任何試劑接觸眼部,立即用大量清水沖洗。
9.其他問題請參見芯片操作指南或與本公司。
[臨床意義] 沙眼衣原體有15種血清型,其中A、B、Ba、C等4種血清型主要與地方性沙眼有關;D~K型可在生殖道感染、結膜炎和嬰兒肺炎中發現;L1、L2、L3等3種血清型可引起性病淋巴肉芽腫。泌尿生殖道疾病如女性的宮頸炎、盆腔炎、子宮內膜炎、男性的附睪炎、兩性的尿道炎、直腸炎均可由沙眼衣原體引起。
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