實驗材料 HeLa 細胞
試劑、試劑盒 FCS磷酸鹽
儀器、耗材 無磷酸培養基
實驗步驟
1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。
2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。
3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加 32P 磷酸鹽至 20 μCi/ml，繼續培養 16 小時。
4. 估算同位素的攝取量：
(1) 加入同位素，混勻后立即吸出 5 μl 培養基于一小離心管，冰浴。
(2) 培養結束后再取 5 μl 培養基。
(3) 通過測定溫育前后培養基活性差來估算放射活性。
5. 提取并分析 RNA。