用于標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性：有高度的活性和敏感性；
在室溫下穩定；
反應產物易于顯現；
能商品化生產。
當前應用較多的有辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應用最廣。
