用夾心法做白介素6試劑盒的檢測實驗
·試劑:包被緩沖液、洗滌液、稀釋液、終止液配制同常規ELISA方法。Tac特異性單克隆抗體、辣根過氧化物酶標記的Tac特異性單克隆抗體,HUT-102B2細胞培養上清,PHA。
·器材:聚苯乙烯塑料板,ELISA檢測儀,37℃水浴箱,4℃冰箱,CO2孵箱。可調加樣器。
重點注意:
1. 包被抗體活性要較高,否則影響本實驗敏感性。
2. 經篩選比較,封閉液以1%BSA-PBS為好。
3. 酶標結合物應用前應進行效價滴定,選擇*佳工作濃度。
4. 底物應選用靈敏度較高的供氫體如ABTS等。
5. 如有條件,酶標McAb可由生物素-McAb和親和素-HRP系統代替,以增加實驗的敏感性。