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  • 發布時間:2019-04-11 14:59 原文鏈接: 用棉花幼苗外植體法測定脫落酸的活性實驗

    實驗方法原理脫落酸能增強果膠酶和纖維素酶的活性,引起離層產生,導致脫落。在一定濃度范圍內,脫落率與脫落酸濃度成正比,脫落時間與脫落酸濃度成反比。
    實驗材料

    棉花幼苗

    試劑、試劑盒

    脫落酸溶液

    儀器、耗材

    手術剪刀單面刀片燒杯鑷子培養皿注射器石英砂蛭石脫脂棉瓊脂

    實驗步驟

    一、材料與設備

    棉花幼苗

    手術剪刀或單面刀片,燒杯,鑷子,直徑10cm 培養皿,100 M  M 3注射器,石英砂或蛭石,脫脂棉,瓊脂

    藥品

    100pp M 脫落酸溶液:20 M g(±)-脫落酸用少量乙醇溶解,用蒸餾水定容至100  ml 。

    1.5%瓊脂培養基:1.5份瓊脂和100份蒸餾水(w/w)放入燒杯中加熱。待瓊脂完全溶解后,趁熱倒入培養皿中,使瓊脂膠厚度達5 MM 左右。

    二、實驗步驟

    1.挑選經硫酸脫絨的飽滿棉種,在28-30℃下浸 24小時,然后播在濕潤的石英砂中,于25℃恒溫箱中照光培養,直至長出第一片真葉。培養期間應經常澆水,以保持石英砂濕潤。

    2.從幼苗上取下外植體。外植體是由5 M  M 真葉葉柄,5 M  M 子葉葉柄和10 M  M 下胚軸組成。在每一切面上包少許脫脂棉。然后將下胚軸插于瓊脂膠中。每皿插10個外植體。

    3.配制0.05,0.5,5,10,20pp M 的脫落酸溶液。

    4.將插有棉花外植體的培養皿分成六組,編號,每組用一種濃度的脫落酸處理。處理方法是用微量注射器在各葉柄的切面上加50 M  M 3脫落酸溶液。

    5.處理24小時后,用鑷子輕碰葉柄,看是否脫落。以后每天早晚用鑷子檢查一次。比較同一時間各處理的脫落率和各處理脫落率達80%所需的時間。

    三、結果

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