用流式法（FACS)分離間質SP細胞實驗2

2?4代的間質細胞

PBSA BSA：PBSA+0.5%BSAPBSA 2FB:含2%FBS的PBSA封閉緩沖液抗體：MAB4155F克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗體-FITC

具有488 nm氬激光器和525 20帶通濾波器的高速細胞分選儀

(a)胰蛋白酶消化2?4代的細胞并計數。

(b)400g離心，10min。

(c)PBSA/BSA洗一遍。

(d)加入10μL抗體（MAB4155F、克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗體-FITC),30 min，置于冰上。

(e)用PBSA/BSA洗一遍后離心。

(f)用高壓高速的細胞分選儀進行流式細胞分選術。488nm的氬激光發生器用于激發熒光素異硫氰酸鹽，525/20帶通濾波器用于測量發射光。用側向散射對前向散射的雙參數圖上的門來除外細胞碎片。收集至少100000個細胞用于分析。

(g)分選出的ABCG2陽性和陰性的細胞群可以用于檢測它們的集落形成率，干細胞標志性基因的表達，以及繼續傳代用于更進一步的研究和體內移植等。