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  • 發布時間:2023-06-02 02:43 原文鏈接: 用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法


    實驗材料

    含蛋白質的樣品

    試劑、試劑盒

    丙酮(或其他有機溶劑如乙醇或甲醇)

    儀器、耗材

    Eppendorf 管(小塑料離心管)Eppendorf 管離心機(小型臺式離心機)混旋器

    實驗步驟

    1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 樣品溶液,混勻。


    2. -20℃: 放置 10 min。


    3. 小型臺式離心機離心 5 min。


    4. 棄去上清液,使沉淀風干。


    5. 于 1~2 倍沉淀體積的緩沖液中再懸浮沉淀。

    注意事項


    1. 反復用丙酮洗滌和沉淀蛋白質 。


    2. 通過延長 -20℃ 的放置時間,達 2 h 以上,再用 27 000 × g 離心 10 min,可以定量沉淀小于 1 ug 蛋白質。


    3. 中性鹽提高蛋白質在有機溶劑中的溶解度,二價陽離子降低蛋白質在有機溶劑中的溶解度。



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