本文采用高效液相色譜法(HPLC)對山楂中幾種水溶性有機酸進行了分析。結果穩定可靠，可為山楂的質量控制提供參考。
1.儀器與試劑
高效液相色譜由,紫外檢測器,柱溫箱,自動進樣器組成。
酒石酸,抗壞血酸,檸檬酸,琥珀酸等有機酸均為純分析。
磷酸二氫鈉及磷酸為分析純；
水為高純水；
流動相經0.45um的膜過濾。
2.參考物質和樣品溶液的制備
準確稱量各有機酸標準物質（草酸12.5 mg、酒石酸25 mg、蘋果酸50 mg、抗壞血酸5 mg、檸檬酸250 mg、丁二酸5 mg），加入50毫升水溶解，并用步進稀釋法制備一系列混合標準樣品。
準確地說，Hawthorn樣品粉末(通過0.45mm孔徑篩)約為1g，加入適量的水，超聲提取0.5h，過濾后將體積固定在50ml容量瓶中，取適量0.45μm濾膜制成樣品溶液。
3.色譜條件
色譜柱：ODS2（4.6mm×250 mm，5um）；
流動相：磷酸二氫鈉緩沖液(pH=2)。 6）；
流速：0.8mL/min；
檢測波長：210nm；
柱溫：25℃；
進樣量：10uL。
4.實驗條件優化
采用純水萃取法提取水溶性有機酸。提取效率高，方法簡單。藥典規定的方法是室溫浸泡，耗時較長。
本實驗采用超聲提取法，分別對提取時間為20 min、30 min和40 min的提取率進行了研究。實驗結果表明，超聲波時間太短，部分物質未提取或提取不足，提取時間過長，色譜圖無明顯差異。因此，根據色譜峰數、峰面積和經濟角度，提取時間應為30min。
對于水溶性有機酸的分離只需有機相的水相即可獲得滿意的分離效果在此條件下對色譜柱無損傷然而，通常需要將酸抑制劑添加到流動相中以調節pH值以抑制有機酸的解離。
當流動相pH值較低時對硅膠柱的鍵合相不利，對柱的破壞較大，而當流動相pH>3時，峰基本不分離因此，流動相的pH值為2。6.在有機酸檢測波長210 nm下，甲酸和乙酸本身的紫外吸收會干擾有機酸的測定，而磷酸緩沖液在紫外區域的吸收很小。選擇磷酸二氫鈉和磷酸鹽緩沖體系來調節pH值。當流速高時，峰時差小，分離效果差。 8 mL/ min。