| 實驗方法原理 | 本實驗用GC、GC/MS技術對口服Selegiline Hydrochloride，一種單胺氧化酶抑制劑的尿中代謝物進行分析測定，確認檢出10種代謝產物，其中三種為新檢測到的羥基化代謝物。 |
|---|---|
| 實驗材料 | |
| 試劑、試劑盒 | Selegiline5藥片selegiline·HClamphetamine·HClmethylamphetamine·HClp-OH-methylamphetamine |
| 儀器、耗材 | |
| 實驗步驟 | 1. 尿樣收集 健康男性(體重65 Kg)口服單次劑量10mg Selegiline 5片劑。分別收集所排各次尿液的全部及服藥前的空白尿，于-20℃。
2.樣品制備 取尿樣5 ml，加入100 mg L-半胱氨酸，0.5 ml濃HCl，于100℃下水解30 min。冷卻后以3 ml叔丁基甲醚提取，分離，棄去醚層。于水相加0.5 ml 12M NaOH，2 g固體緩沖劑(NaHCO3：K2CO3=3：2，pH9.6)。以3 ml含二苯胺為內標的叔丁基甲醚/異丙醇(9:1)溶液， 振搖。分離提取液，于N2氣下吹干， 以 1 ml乙酸乙酯溶解殘渣，GC/NPD進樣2 μL。之后于N2氣下濃縮至約50 μL。于GC/MSD進樣2 μL。然后吹干，于殘渣中加入100 μL乙酸乙酯和100 μL三氟乙酰酐(TFAA)，70℃反應20 min。于N2氣下吹干，再以100 μL乙酸乙酯溶解，GC/MSD進樣2 μL。在進行selegiline代謝物amphetamine，methylamphetamine及norSelegiline尿中排泄趨勢試驗中，尿樣提取程序如下：分別取0-72小時收集的各份尿樣5 ml，加入0.5 ml 5M KOH，3 g NaCl，2 ml 5 ppm二苯胺(內標)的叔丁基甲醚溶液，振搖，離心，分離醚層，于GC進樣2 μL。 |
| 注意事項 | 取0~72小時的尿液樣本應注意操作，避免引入污染。 |
| 其他 | 來源：《用GC、GC/MS方法檢測人尿中Selegiline及其代謝物》 |