用Twave離子淌度質譜鑒定豬肌肉中多位點分子離子（一）

利用T-wave離子淌度質譜鑒定豬肌肉中的氟喹諾酮類抗生素的多位點分子離子及其碎片離子
Mike McCullagh1、Sara Stead¹、Jonathan Williams¹、Wouter de Keizer²和Aldert Bergwerff²

¹沃特世公司（英國曼徹斯特） ²RnAssays BV（荷蘭烏得勒支）

應用優勢
利用T-wave離子淌度產生的正交分離有助于復雜基質樣品的分析。
■正交淌度分離技術能采集并生成復雜樣品中各個組分的MS母離子和MSE子離子譜圖。
■對于觀察到的促進劑，可進行再次確認，并將其作為額外的鑒定點。
■使用HDMSE作為分析手段，可以對實驗室間或實驗室內研究的差異性進行更深入的了解。

沃特世解決方案
ACQUITY UPLC?系統
SYNAPT?G2-S質譜儀
MassLynx?軟件
DriftScope? ACQUITY UPLC BEH色譜柱

簡介

氟喹諾酮是一類抗菌劑，可施用于牲畜，以達到多種目的，包括：(a)預防并控制感染；(b)促進生長。出于對抗性微生物在人類中傳播的顧慮，美國食品藥品監督管理局（FDA）于2005年9月頒布了在牲畜生產中使用恩諾沙星和環丙沙星的禁令^1,2。2006年起，歐盟（EU）禁止在畜牧業中使用抗生素生長促進劑（AGP），同年，最后四種抗生素也被禁止作為生長促進劑³。

雖然氟喹諾酮是一類化學性質多樣的兩性化合物，但這些化合物都具有4-喹諾酮環基本結構。為了增強其抗菌能力和藥代動力學特性，已進行了多種改性嘗試，包括在喹諾酮環（苯并吡喃酮核）四周引入不同的官能團。氟喹諾酮在其雙環結構的6位上帶有一個氟原子（圖1），表現出廣譜抗菌活性。目前，規定了八種（氟）-喹諾酮類化合物的歐盟最大殘留量（MRL），根據種類和組織類型的不同，限量范圍在10至1900 μg kg-1之間⁴。

實驗

提取準備
用于此次研究的豬肌肉組織提取物由RnAssays慷慨提供。簡單來講，在提取前根據相關的歐盟最大殘留量濃度要求，在已知的空白豬肌肉添加25種不同的抗菌化合物（來自于氟喹諾酮、四環素和酰胺醇類），將其在水/有機提取溶劑中，機械研磨成勻漿，然后進行離心操作。取上清液，并置于自動進樣器樣品瓶中進行后續的LC/MS分析。

UPLC條件
系統：  ACQUITY UPLC
色譜柱：  ACQUITY UPLC BEH C18 1.7 μm， 50 × 2.1 mm
柱溫：  40 ℃
流速：  0.6 mL/min
流動相A：  水（0.1%甲酸）
流動相B：  乙腈（0.1%甲酸）
進樣體積：  10 μL