多聚類異戊二烯取代物的確證
羧基甲基化的證實
| 實驗材料 | 蛋白 |
|---|---|
| 試劑、試劑盒 | 牛血清白蛋白 氫氧化氨 |
| 儀器、耗材 | 試管 |
| 實驗步驟 | 1. SDS-PAGE 和電洗脫分離目的蛋白。 2. 洗脫的蛋白中加牛血清白蛋白載體使最終濃度為 0.1 mg/ml,并用 5 倍體積的含 1.5% 氫氧化氨的冰冷丙酮處理 30 分鐘以沉淀蛋白。 3. 離心收集沉淀蛋白,倒掉上清,在真空下干躁沉淀物。 4. 在 0.4 ml 的乙醇:甲酸(4:1 ) 溶液中重懸蛋白,并轉到一個帶玻璃螺絲帽的試管中。 ![]() 5. 加 0.1 ml 的拉尼鎳混合液(Aldrich),然后加 1 ml 水飽和戊烷。 6. 用 Teflon 帶繞細線封緊試管,并用 Teflon 線擰上一個帽。 7. 在 100℃ 熱塊上加熱試管過夜。 8. 取出頂層保存在一個新試管中,然后再用 1 毫升戊烷再次抽提底層。 9. 收集戊烷層于圓錐型樣品瓶中,在鹽水冰浴中蒸發到干燥。 10. 用 100~200 μl 的己烷清洗試管的側壁,將己烷溶液倒入一個干凈的錐形樣品瓶中,并且蒸發至較少的體積(10~20 μl)。 11. 通過放射氣相液體色譜法分析樣品,使用 15 m、DB-5、中等極性的百萬孔的柱子去分離并按照下列條件走柱: 后始溫度,100℃;啟始時間,4 分鐘;速率,每分鐘 10°。最終溫度,300℃;最終時間,1 分鐘。 |
近日,中國農業科學院深圳農業基因組研究所(嶺南現代農業科學與技術廣東省實驗室深圳分中心)和佛山鯤鵬現代農業研究院研究員唐中林團隊在國際期刊《腸道微生物》(GutMicrobes)上發表論文。該研究揭示......
記者10月6日從華中農業大學獲悉,該校棉花遺傳改良團隊開發出基于CRISPR/dCas13(Rx)的新型植物RNA甲基化編輯工具。研究成果日前發表于《先進科學》雜志。N6-甲基腺苷(m6A)是真核生物......
DNA甲基化是表觀遺傳修飾的重要組成部分,可以通過改變染色質的結構、DNA的穩定性以及DNA和蛋白質的結合程度調控基因表達。在植物DNA甲基化的建立和維持過程中,植物特有的RNA聚合酶V(PolV)通......
植物是復雜的生物系統。植物體內基因的表達受到多種水平的調控,如轉錄水平、轉錄后水平、DNA甲基化/去甲基化等,從而對基因表達進行精密高效的調控。中國科學院遺傳與發育生物學研究所張勁松研究組篩選OsEI......
時間如梭,衰老是自然界不可抗拒的規律,但衰老的步伐并非一成不變——即使在同齡人之間,生理功能的衰退和器官老化的程度也存在顯著差異。這些差異性說明個體的生物學年齡,即生理狀態所反映的年齡,可能與其實際年......
中國科學院分子細胞科學卓越創新中心研究員石建濤,聯合上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院教授方海,在《基因組研究》(GenomeResearch)上,在線發表了題為ADNAmethylationhaplot......
微藻在全球光合作用、二氧化碳固定及初級生產力中貢獻卓著,是頗有前景的合成生物學底盤細胞。為了探索工業固碳產油微藻的表觀遺傳機制和生理作用,中國科學院青島生物能源與過程研究所單細胞研究中心以海洋微擬球藻......
9月14日,《自然-通訊》(NatureCommunications)在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心石建濤組完成的最新合作研究成果(DNAmethylationprofilingtode......
自閉癥(ASD)和精神分裂癥(SCZ)是常見的慢性精神疾病,在行為、遺傳學和神經病理學等方面存在相當多的重疊特征,提示自閉癥和精神分裂癥可能存在共同的神經發病機制。衰老與表觀遺傳效應的動態變化密切相關......
衰老,是一個復雜、多階段、漸進的過程,發生在生命的整個過程。隨著時間的流逝,人體的器官、肌肉會逐漸衰老,一些疾病也伴隨著年齡的增長而發生,包括癌癥、糖尿病、心血管疾病等。DNA甲基化,是一種DNA上的......