一、取材
1. 麻醉家兔，解剖暴露支氣管，用刃器切取小段支氣管，剖開。
2. 再切取2x5 mm 大小的一塊管壁，保護要觀察的內表面（即粘膜面），并用緩沖液或生理鹽水清洗二次。
3. 如粘膜表面有較多粘液時，可用胰酶溶液消化，再清洗。
二、固定
1. 把標本迅速投入固定液中，其固定程序與透射電鏡標本同。
三、導電處理
1. 把經鋨酸固定的標本清洗后放入2%單寧酸中處理10分鐘。
2. 再用雙蒸水清洗3次，然后放入1%鋨酸中處理30分鐘。
四、脫水
1. 把用雙蒸水洗過的標本依次放入30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%乙醇中脫水各10分鐘。
2. 然后將標本移入乙酸異戊酯中，置換出乙醇。
五、臨界點干燥
1. 臨界點干燥是掃描電鏡標本制備的一種重要干燥方法，它能消除表面張力，使標本在干燥過程中不損傷、不變形。
2. 將標本置入臨界點千燥器的密閉標本室中，打開進氣閥門，充入液體CO2，其量不少于標本室容積的2/3。
3. 關閉開關，并升溫使達到臨界狀態（31.4℃，72.8大氣壓），此時液態與氣態界面消失。
4. 加溫過程中溫度可達40℃，標本室內壓力可達80~120大氣壓，然后緩慢放氣，放氣時間不應少于2小時。
圖1 掃描電子顯微鏡構造原理及主要部件
六、鍍膜
1. 把干燥的標本用導電膠固定在標本臺上（注意觀察面向上），把標本臺放在離子鍍膜機陽極載臺上。
2. 在低真空下（0.1 Torr）加高電壓（1 000~1 200伏）使陰極（金靶）與陽極間形成電場，把殘存的氣體分子電離，陽離子打向金靶，金原子濺射出來落在標本表面，形成一層金膜。
3. 這不僅保存了組織表面形態，而且電子束射到標本上容易激發二次電子，并有良好的導電性能，可產生質量好的圖像。
七、觀察支氣管纖毛上皮的表面立體超微結構
1. 支氣管纖毛上皮表面結構：支氣管粘膜表面有許多纖毛，纖毛排列密集，是由纖毛細胞頂端發出的，在纖毛間可見有杯狀細胞，在杯狀細胞的表面有長短不一的微絨毛。 展 | 