電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區帶電泳大類,自由界面電泳不需支持物,如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。區帶電泳需用各種類型的物質作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠?DG薄層等,分子生物學實驗中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。應用電泳法可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀(北京六一儀器廠)為例介紹其使用方法。
1.使用方法
(1)按電源開關,顯示屏出現“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后,同時系統初始化,蜂鳴4聲,設置常設置。屏幕轉成參數設置狀態,見圖一:
U: 0V U= 100V | Mode: STD
I: 0mA I = 50mA |
P: 0W P= 50W |
T: 00:00 T= 01:00 |
其中:左側大寫U: I: P: T: 為電泳時實際值;中間部分顯示程序的常設值(預置值)。Mode(模式):STD(標準);TIME(定時);VH(伏時);STEP(分步)
(2)設置工作程序。用鍵盤輸入新的工作程序。例如,要求工作電壓U=1000V,電流I限制在200mA以內,功率W限制在100W以內,時間T為3小時20分,并且到時間自動關掉輸出。則操作步驟如下:
①按“模式”鍵,將工作模式由標準(STD)轉為定時(TIME)
模式。每按一下模式鍵,其工作方式按下列順序改變: STD?TIME?VH?STEP?STD。
②先設置電壓U,按“選擇”鍵,先將其反顯,然后輸入數字鍵即可設置該參數的數值。按數字1000,則電壓即設置完成。
③設置電流I,按“選擇”鍵,先使I反顯,然后輸入數字200。
④設置功率P,按“選擇”鍵,先使P反顯,然后輸入數字100。
⑤設置時間T,按“選擇”鍵,先使T反顯,然后輸入數字320。如果輸入錯誤,可以按“清除”鍵,再重新輸入。
⑥確認各參數無誤后,按“啟動”鍵,啟動電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態欄中顯示Start! 并蜂鳴4聲,提醒操作者電泳儀將輸出高電壓,注意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設置值。同時在狀態欄中顯示“Run”,并有兩個不斷閃爍的高壓符號,表示端口已有電壓輸出。在狀態欄最下方,顯示實際的工作時間(精確到秒)。
⑦每次啟動輸出時,儀器自動將此時的設置數值存入“MO”號存儲單元。以后需要調用時可以按“讀取”鍵,再按“0”鍵,按“確定”鍵,即可將上次設置的工作程序取出執行。
⑧電泳結束,儀器顯示:“END”,并連續蜂鳴提醒。此時按任一鍵可止鳴。
6月5日,11:00a.m. 美國中部夏令時間馬薩諸塞州弗雷明漢——在ASMS2023上,生命科學分析技術制造商SCIEX推出了Intabio? ZT系統,這是一個在單一平臺上結合......
6月5日,11:00a.m. 美國中部夏令時間馬薩諸塞州弗雷明漢——在ASMS2023上,生命科學分析技術制造商SCIEX推出了Intabio? ZT系統,這是一個在單一平臺上結合......
毛細管電泳具備如下優點:(1)高效塔板數目在105-106片/m間,當采用CGE時毛細管電泳色譜圖,塔板數目可達107片/m以上;(2)快速一般在十幾分鐘內完成分離;(3)微量進樣所需的樣品體積為nL......
瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定DNA、RNA的方法,這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支持物,利用DNA分子在泳動時的電荷效應和分子篩效應,達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負電,......
電泳電壓一般100v到300V如果超過或低于這個范圍就容易出現偏厚或偏薄有可能泳泳不上,特別注意電泳電壓超過300V后就會擊穿電泳漆。導致電泳漆過快老化......
分析測試百科網訊2020年11月16日-18日,慕尼黑上海分析生化展在上海新國際博覽中心隆重召開。魯美科斯攜全自動測汞儀RA-915Lab、AriaDNA微芯片實時熒光定量PCR儀、高效毛細管電泳儀C......
2%的瓊脂糖凝膠電泳跑多少時間合適看染料的位置就好了,怕時間太短你可以放回去繼續跑嘛......
影響電泳遷移率的外界因素:①電場強度②溶液的pH值③溶液的離子強度④電滲現象影響電泳遷移率的內在因素:①質點所帶凈電荷的量②質點的大小和形狀......
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過......
電泳法分離混合蛋白質的基本原理是根據蛋白質的電荷不同即酸堿性質不同分離蛋白質混合物的方法。電泳:在外電場的作用下,帶點顆粒將向著與其電性相反的電極移動,這種現象稱為電泳。電泳技術可用于氨基酸、肽、蛋白......