電泳儀、電泳槽的使用方法

電泳儀：電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區帶電泳兩大類，自由界面電泳不需支持物，如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等，這類電泳目前已很少使用。而區帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物，常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等，分子生物學領域中*常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳，是指帶電粒子在電場中的運動，不同物質由于所帶電荷及分子量的不同，因此在電場中運動速度不同，根據這一特征，應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析，或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備，這在臨床檢驗或實驗研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設計制造的。下面簡單介紹其使用方法及注意事項。
● 使用方法
1． 首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯接，注意極性不要接反。
2． 電泳儀電源開關調至關的位置，電壓旋鈕轉到*小，根據工作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流范圍。
3． 接通電源，緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止，設定電泳終止時間，此時電泳即開始進行。
4． 工作完畢后，應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態，并撥出電泳插頭。
注意事項
1． 電泳儀通電進入工作狀態后，禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳槽內取放東西，如需要應先斷電，以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端，以防漏電。
2． 儀器通電后，不要臨時增加或撥除輸出導線插頭，以防短路現象發生，雖然儀器內部附設有保險絲，但短路現象仍有可能導致儀器損壞。
3． 由于不同介質支持物的電阻值不同，電泳時所通過的電流量也不同，其泳動速度及泳至終點所需時間也不同，故不同介質支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
4． 在總電流不超過儀器額定電流時（*大電流范圍），可以多槽關聯使用，但要注意不能超載，否則容易影響儀器壽命。
5． 某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時，允許在穩壓狀態下空載開機，但在穩流狀態下必須先接好負載再開機，否則電壓表指針將大幅度跳動，容易造成不必要的人為機器損壞。
6． 使用過程中發現異常現象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電源，進行檢修，以免發生意外事故。

夾芯式垂直電泳槽使用方法：

一、組成部件

(一)裝有鉑金絲的貯液槽一對，配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。

(二)凹型橡膠框，配有玻璃板，可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板，操作時根據需要選擇適當厚度的玻璃板及梳子配套使用。

(三)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。

(四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對，28D、30型為5對。

(五)橡膠管五根。兩根長的用于連接冷卻水的出入口；中等長度的兩根用于連接電極緩；中液的流出口；*短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。

(六)導線1付。

● 二、使用方法

(一)清洗部件

上述部件組裝前要徹底清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框，必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑徹底清洗干凈。清洗后的玻璃板應放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。

(二)組裝電泳槽

A、1、將四只固定螺桿插到一只貯液框(半上槽)的相應孔洞中，然后將貯液框仰放在桌上。

2、左手拿凹型槽橡膠模框，右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣插到橡膠模框內 (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。

3、將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上，其下緣必須對齊貯液槽框下緣。

4、雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合，并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機玻璃框中央。

5、裝上四只螺母，擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時用力應均勻，*好用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。

6、將電泳槽垂直豎起，放在桌上，帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰極端)，帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽極端)，在長玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10％瓊脂沿長玻璃板下端灌入，為防止留存氣泡，可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂完全凝固后才能灌膠。

B、也可將槽垂直豎起，將帶有玻璃的橡膠模框直接放入槽中，對稱擰緊螺絲后，用瓊脂封底邊。

(三)灌膠

1、先灌分離膠，待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水，夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。

2、用細頭滴管吸取膠液，沿長、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產生氣泡，可稍拾起另一端(氣泡往高處走)，不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處，輕輕加少許水，雙手輕輕將梳子插入，待膠凝后就可形成凹形加樣孔。

3、為防止漏膠，在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水，但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。

4、膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折射率不同的亮區。

(四)加樣

1、松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子，放掉槽內的蒸餾水，待水流完后，再夾緊夾子。

2、雙手輕輕取出樣品梳子，即可看到界線清楚的加樣孔，將孔中水分吸去(注意千萬不要碰壞孔沿的字面)。

3、在上、下貯液槽中加入緩；中液，液體高度應超過上貯液槽短玻璃板上緣。

4、用微量注射器吸取一定量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(注意加樣動作要輕，針頭不能碰壞膠面)。

(五)電泳

一貯液槽導線與電泳儀的負極相連，下貯液槽導線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤，方可按照所要求的電壓電流進行電泳。

(六)取出膠板

電泳結束，旋松螺母，取出膠框，剝出玻璃板，在兩塊玻璃板下角空隙內，用刀片背面輕輕撬動，即可將膠面與一塊玻璃板分開，將有膠板的玻璃板平放在桌上，雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起，放在大培養皿中染色，膠板經漂洗、脫色后即可看到清晰的分離條帶。