• <table id="4yyaw"><kbd id="4yyaw"></kbd></table>
  • <td id="4yyaw"></td>
  • 發布時間:2020-07-27 13:14 原文鏈接: 電泳帶型分析

    DNA電泳需要進行帶型分析,在實驗過程中常會發現所得的帶型出現在這樣那樣的問題。在此,我們對DNA帶型做了相應的分析。


    帶型

    原因分析

    解決辦法

    弱帶或無帶

    上樣的DNA量不夠

    增加DNA的上樣量,聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高

    DNA降解

    避免DNA的核酸酶污染


    電泳時間過長,DNA跑出

    減短電泳時間,降低電壓,增強凝膠濃度


    EB染色的DNA,紫外光源不合適

    應用短波長(254nm),增強紫外燈靈敏度


    DNA帶缺失

    小DNA帶走出凝膠

    減短電泳時間,降低電壓,增強凝膠濃度

    分子大小相近的DNA帶不易分辨

    增加電泳時間,核準正確的凝膠濃度


    DNA 變性

    電泳前請勿高溫加熱DNA鏈,以20mM NaCl Buffer稀釋DNA


    巨大DNA鏈,凝膠電泳不合適

    在脈沖凝膠電泳上分析


    DNA帶模糊

    DNA降解

    避免核酸酶污染

    DNA上樣量過多

    減少凝膠中DNA上樣量


    所用電泳條件不合適

    電泳時電壓不應超過20V/cm,溫度<30℃,巨大DNA鏈,溫度應<15℃,核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力


    DNA樣含鹽過高

    電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽


    有蛋白污染

    電泳前酚抽提去除蛋白


    DNA變性

    電泳前勿加熱,用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA


    不規則DNA帶遷移

    對于λ/Hind III片段COS位點復性

    電泳前加熱DNA 65℃加熱5-10分鐘,然后在冰上冷卻5分鐘

    電泳條件不合適

    電泳電壓不超過20V/cm,溫度<30℃,電泳緩沖液有足夠的緩沖能力


    DNA變性

    以20mM NaCl Buffer稀釋DNA,電泳前勿加熱



  • <table id="4yyaw"><kbd id="4yyaw"></kbd></table>
  • <td id="4yyaw"></td>
  • 调性视频