熒光素
1)FITC
2)RB200
3)TRITC
4)鑭系:Eu、Tb
5)PE
6)其它
常見熒光素的特性
1)FITC:黃色結晶粉末,吸收光:490~495nm,發射光:520~530nm,明亮的黃綠色熒光。
2)RB200:橘紅色粉末,吸收光570nm,發射光595~600nm,橘紅色熒光。
3)TRITC:紫紅色粉末,吸收550nm,發射光620nm,橙紅色熒光。
4)鑭系:Eu、Tb
5)PE:吸收光490~560nm,發射光595nm,紅色熒光。
6)其它:酶作用后產生熒光物質。
酶作用生物質
酶 底物 產物 激發光 發射光
Β-G MUG MU 360 450
AP MUP MU 360 450
HRP HPA 二聚體 317 414
⑷合適熒光素的選擇
1)具有與蛋白質形成共價鍵的化學基團。
熒光素-N=C +NH-蛋白質 熒光素-N-C-N-蛋白質
‖ ︱ ︱‖ ︱
S H H SH
2)熒光效率高,標記后下降不明顯。
3)熒光色澤與背景色澤對比鮮明。
4)標記后能保持生物學活性和免疫活性
5)標記方法簡單、快速。
6)安全無毒