病原微生物染色實驗——抗酸桿菌

結核桿菌和麻風桿菌通常稱為抗酸桿菌，由于菌體內含有脂質蛋白質和多糖類物質，并由糖脂形成一個蠟質的外殼，當染色劑結合形成復合物后，用含酸分化劑處理也不易脫色，具有抵抗酸的作用，所以被稱為抗酸桿菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸桿菌染色法。

石蠟組織切片

二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水堿性復紅石炭鹽酸酸

滴管

石炭酸-復紅液：堿性復紅 1 g，純乙醇 10 ml，石炭酸（5％）水溶液 100 ml，堿性復紅溶于乙醇內，然后與石炭酸水溶液混合，用前過濾。

1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。

2. 浸入石炭酸-復紅液 1 h，于 37℃ 或 56℃ 溫箱內 30 min。

3. 自來水洗，蒸餾水 1 min。

4. 用 0.5％ 鹽酸乙醇液分化，浸入自來水洗 1 min。

5. 蒸餾水洗，0.1％ 亞甲藍水溶液處理 1 min。

6. 蒸餾水 1 min，95％ 乙醇快速分化。

7. 無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

1. 石炭酸-復紅液染色后，注意鹽酸乙醇分化適中，必要時在顯微鏡下觀察。

2. 亞甲藍（美藍）染色應淺些，便于對比清楚。

結果：抗酸桿菌呈紅色，細胞核呈藍色。