病原微生物染色實驗

實驗方法原理

真菌是常見的致病菌，其成分含有較多的黏多糖和蛋白質，通過氧化劑，能夠促使菌壁的多糖暴露出醛基，然后再與 Schiff 試劑進行結合，生成新的復紅復合物而顯示真菌的存在，常用高碘酸-復紅染色法。

實驗材料 石蠟組織切片

試劑、試劑盒 二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水高碘酸Schiff 試劑

儀器、耗材 滴管

實驗步驟

高碘酸氧化劑：高碘酸 0.5 g，蒸餾水 99 ml。

Schiff 試劑染色液（參見糖原染色液）。

1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。

2. 高碘酸氧化劑處理 10 min，流水洗 2 次。

3. 蒸餾水洗 2 次，Schiff 試劑染色液處理 20 min 左右，15℃ 以下時在濕盒內加入 50℃ 溫水，可加快染色時間。

4. 浸入自來水洗 2 min，明礬-蘇木精進行復染 10 s。

5. 無水乙醇脫水，二甲苯透明和中性樹膠封固。

注意事項

1. 高碘酸氧化劑置冰箱內保存，可用較長時間。

2. Schiff 試劑染色后，不宜水洗時間較長，以免背景較深。

其他

結果：真菌呈紫紅色，背景無色。