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  • 發布時間:2019-04-09 19:44 原文鏈接: 病毒的血清學實驗——病毒紅細胞凝集試驗

    實驗方法原理有些病毒(如流感病毒等)表面有血凝素(為糖蛋白)在一定條件下,能與雞,豚鼠的紅細胞表面的糖蛋白受體結合而發生凝集現象。利用病毒血凝試驗可以檢測某些病毒的存在,滴定病毒的血凝效價,便可大致估計病毒顆粒的數量(1 個血凝單位=106病毒顆粒)。若血清中出現特異性抗體與相應病毒結合后,使病毒失去凝集紅細胞的能力,從而抑制血凝現象的出現,此為血凝抑制現象。
    實驗步驟


    1.  取一塊洗凈晾干的20 孔凹窩塑料板,用蠟筆做好標記。用帶有橡皮吸頭的吸管,于1~6 孔內各加人生理鹽水0.2 ml,在第1 孔內加入已經稀釋成1:5 的流感病毒尿囊液0.2 m1,混勻后吸出0.2 ml 至第2 孔,再混勻后吸0.2 ml 至第3 孔,如此稀釋到第8 孔(病毒稀釋度即分別為1:10~1280),自第8 孔吸出0.2 ml 棄去(棄于消毒缸中),第9 孔不加流感病毒尿囊液,作紅細胞對照。
    2.  每孔加人1% 雞紅細胞0.2 m1,搖勻后置室溫45 分鐘。

    3.  觀察結果時,直接觀察塑科板孔內的紅細胞凝集式樣,判斷結果并作記錄。

    最高病毒稀釋度呈\"++\" 凝集者作為病毒的紅細胞凝集滴度,亦即1 個血凝單位。例如1:320 為" ++",即為1 個血凝單位,在紅細胞凝集抑制試驗中,病毒血凝素需用4個單位,按上例1 個血凝單位為1:320,則1:80 含病毒的尿囊液即為4 個血凝單位。

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    注意事項

    1.  用反復吹吸法稀釋混勻病毒或血清時,手法要輕,穩,盡量減少氣泡出現;

    2.  為了實驗準確,加紅細胞時,應從最后一孔起向前加;

    3.  加樣畢,可將塑料板放光滑臺面上慢慢劃圈搖勻,但要防止濺出;

    觀察結果時,塑料板底部墊上白紙,減少移動并按時觀察,若延續時間太長,則可能出現病毒凝集紅細胞后再解離的現象,從而影響結果觀察。


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