病毒的血清學實驗—EB病毒VCAIgA試驗

取冷存的EB 病毒抗原靶細胞涂片置室溫中吹干。

用0.01 M，pH7.4 PBS 將即檢血清作1：5，1：10 ，1：20 稀釋，將各稀釋度血清滴加至細胞涂片的小圓穴中，勿使液體外溢。

置于濕盒中在37 ℃溫箱作用30 分鐘，用同一PBS 浸洗三次，每次5 分鐘，末次浸洗后在室溫中吹干。

滴加酶標抗體于各小圓穴內，置濕盒中在37 ℃作用60 分鐘，同上法浸洗三次。

將新鮮配制的底物溶液滴加在整個涂片上，避光作用10 分鐘后，傾去底物溶液，置于無水乙醇中浸3 分鐘使脫水。

滴加中性樹膠于涂片上，加蓋玻片封固，在低倍顯微鏡下觀察結果。

結果判斷：
陰性細胞：細胞不著色，或呈淺棕色與背景相同。

陽性細胞：細胞顯示不同程度的棕色，胞膜染色較深，細胞表面可見棕色顆粒。

按陽性細胞著色強度和數量，將陽性分為四級：

++++：每個視野內有100 個以上陽性細胞，是深棕色；

+++：每個視野內有數十個陽性細胞，呈棕色；

++：每個視野內有少數陽性細胞，是淡咖啡色；

+：在若干個視野內才見少數陽性細胞，呈淡咖啡色。

此法簡便敏感，適于對人群普查鼻咽癌，有助于早期診斷鼻咽癌。

有助于診斷和鑒別診斷鼻咽癌：用VCA-IgA 試驗檢測鼻咽癌患者，抗體陽性率在90% 以上，抗體滴度1：10 以上或滴度持續上升者，對鼻咽癌有輔助診斷意義。鼻咽癌患者抗體滴度較高，其他腫瘤和正常人血清的抗體陽性率均在6% 以下，且抗體滴度低。

有助于判斷療效和預后：病人療效顯著時，血清中的VCA-IgA 抗體逐漸下降或消失；療效差，鼻咽癌復發或遠處轉移時抗體滴度回升。