回收率研究
五天內在不同的三個地點,兩個不同的操作者完成對登革熱 IgM Capture ELISA檢測試劑盒可重現性研究實驗的評估.樣本(包括質控)均同時采用三份檢測.實驗分別在佛羅里達州一間公共健康實驗室, InBios,美國中部的一家實驗室.此次研究實驗采用4份血清樣本(均按照相關規定稀釋).包括一份陰性樣本,一份剛低于可疑范圍的樣本,一份可疑樣本,一份陽性樣本.血清樣本的稀釋均符合臨床相關要求檢測的濃度范圍.具體結果見下表.
表13：inbiosa公司登革熱試劑盒的再現性
板間試驗 | 不同的時間 | 不同的操作者 | 不同的地點 | 合計 | ||||||||
樣品 | N | ISR平均值 | Swr | %CVwr | SOD | %CVOD | SOO | %CVOO | Sss | %CVss | ST | %CVT |
板A | 90 | 1.133 | 0.148 | 13.06 | 0.056 | 4.96 | 0.066 | 5.86 | 0.064 | 5.63 | 0.158 | 13.97 |
板B | 90 | 1.587 | 0.245 | 15.41 | 0.187 | 11.79 | 0.182 | 11.44 | 0.081 | 5.11 | 0.308 | 19.40 |
板C | 90 | 2.433 | 0.621 | 25.52 | 0.668 | 27.46 | 0.522 | 21.44 | 0.207 | 8.52 | 0.912 | 37.49 |
板D | 90 | 5.821 | 1.18 | 20.28 | 2.014 | 34.59 | 1.072 | 18.41 | 0.693 | 11.91 | 2.334 | 40.10 |
陽性質控 | 90 | 11.944 | 1.692 | 14.17 | 2.437 | 20.40 | 2.085 | 17.46 | 1.546 | 12.94 | 2.967 | 24.84 |
陰性質控 | 90 | 1.148 | 0.152 | 13.25 | 0.088 | 7.67 | 0.064 | 5.61 | 0.051 | 4.47 | 0.176 | 15.31 |
所有值都用DENRA/NCA比值計算
Sx=標準劃分，如wr是板間試驗，DD不同天地試驗，OO不同操作者的試驗，SS不同地點的試驗
CV=變異系數
交叉反應研究
用登革熱 IgM Capture ELISA檢測試劑盒檢測帶有幾種疾病(見下表)的血清樣本.樣本均采用雙份檢測.檢測得到陽性和可疑性的樣本采用一式三份重測.用血小板減少中和反應檢測陽性樣本是為了評估登革熱病毒的可暴露性.明顯的交叉反應只在西尼羅河病毒中觀察到。
表14：交叉反應
疾病或致病原 | 樣品數 | DENV Detect IgM ELISA | 可疑和陽性樣品合計 | 陽性或可疑率 | |
可疑 | 陽性 | ||||
東部馬腦炎a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
乙腦a | 2 | 0 | 0 | 0/2 | 0% |
圣路易型腦炎a | 4 | 0 | 0 | 0/4 | 0% |
乙型肝炎a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
EB病毒a | 15 | 0 | 0 | 0/15 | 0% |
類風濕因子a | 7 | 0 | 0 | 0/7 | 0% |
丙型肝炎a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
巨型細胞病毒a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
核抗體a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
水痘帶狀皰狀病毒a | 10 | 0 | 0 | 0/10 | 0% |
萊姆病a | 5 | 0 | 0 | 0/5 | 0% |
鉤端螺旋體a,b | 11 | 0 | 0 | 0/11 | 0% |
西尼羅河a | 24 | 4 | 8 | 12/24 | 50% |
合計 | 112 | 4 | 8 | 12/128 | 9.4% |
a:篩查其他含有特異性IgM抗體的樣品，與瘧疾IgM抗體的交叉反應不能用inbios的登革熱檢測試劑盒評估
b:PRNT試驗中，鉤端螺旋體樣品與登革熱酶免試驗發生反應，呈陽性（表格中不包括此結果，因為它不是真陽性樣品）
除掉三份血清樣品（一份西尼羅河陽性，一份乙腦陽性和一份鉤端螺旋體陽性）的其他128份樣品經PRNT驗證后為陽性，24份篩查出的陽性或可疑樣品經登革熱ELISA重測后，有12份西尼羅河陽性樣品，與西尼羅河的交叉反應率為50%。