實驗方法原理 毒素與抗毒素在瓊脂內擴散相遇，當其比例適合時可形成肉眼可見的特異性沉淀線。本試驗法代替動物皮內試驗，其優點為簡便，不需動物，且與動物試驗結果基本一致。
實驗步驟
取磷酸鹽蛋白瓊脂11ml加熱溶解，待冷卻至50 ℃傾入已滅菌的7.5 cm直徑的平皿中。
待凝固后，放入37℃溫箱約一小時使培養基表面干燥。
鑷取小圈濾紙片浸于白喉抗毒素中（注意取出時濾紙上剩余液體應使流去），然后將含有抗毒素的圓濾紙片置平板中央。
于距離小圓濾紙片邊緣6-8mm處，接種數株待檢白喉棒狀桿菌培養物，接種面積約等于小圓濾紙片的大小（接種菌量宜多一些）。
置37 ℃孵育24-48h，陽性者于小圓濾紙片與培養物之間出現一條白色沉淀線。
其他
如待檢菌株有毒力則與含白喉抗毒素的濾紙片之間出現一條清晰的白色沉淀線；如設有陽性對照，則此沉淀線往往與陽性對照株的沉淀線相吻合