免疫熒光技術的原理是不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。間接免疫熒光試驗是將熒光素標記的抗體先與特異性抗體抗原復合物反應，形成抗原-抗體-抗抗體復合物體系。染色程序分為兩步，第一步：用未知未標記的抗體（待檢標本）加到已知抗原標本上。第二步：加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應，標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合，從而可鑒定未知抗體。皮膚間接免疫熒光試驗可用于感染性疾病的病原學診斷和結締組織病、大皰性皮膚病和其他自身免疫病的診斷。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低，而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。