1. 用 1 ml 大腸桿菌 B/r 的過夜培養物接種 15 cm 的 SM 瓊脂平板，均勻涂布平板表面。
2. 用玻璃棒收獲厚菌苔，并充分重懸于 10 ml 1X Sorensen's 緩沖液中，用 10 ml 1X Sorensen's 緩沖液洗平板一次，并加到細菌懸液中。向細菌懸液中加入 40 ml 1X Sorensen's 緩沖液并充分旋轉混勻。這種細菌儲存液可于 4℃ 儲存 1 周。
3. 加 5 ml 細菌儲存液到一個滅菌的 50 ml Erlenmeyer 錐形燒瓶中，與來自一個果實體的一個孢子頭共同孵育。
4. 于室溫以 240 r/min 振蕩培養 16~24 小時。
5. 用血細胞計數器計數細胞數。
6. 以此培養物作為所需體積新培養物的種子液。
7. 以 100 g 離心力進行差速離心 2~5 分鐘，除去殘留的細菌以收獲細胞，將細胞重懸于 1X Sorensen's 緩沖液，再次離心沉淀細胞。
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