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  • 發布時間:2019-04-13 13:24 原文鏈接: 直接法血清鉀鈉火焰光度分析實驗

    實驗方法原理火焰光度分析法,是一種發射光譜分析法,被測溶液經壓縮空氣霧化后于可燃氣體混合后燃燒成火焰,由火焰激發后,各元素可發射出特有的光譜,由于火焰的激發能量較低,故被激發的元素只現于堿金屬與堿土金屬。鉀的光譜是暗紅色,其波長為765nm,Na的光譜是黃色,其波長為589nm。溶液中的金屬元素濃度愈大,所發射的光譜愈強,因此在一定的激發條件下,例如可燃氣體與壓縮空氣的壓力與標本液的流速等因素保持一致,則溶液的濃度與火焰光度計檢測流計的指針讀數成正比,通過與己知濃度的標準液進行比較,便可求出標本中鉀或鈉的濃度。
    儀器、耗材

    HG-Ⅲ型火焰光度計HG-5型火焰光度計

    實驗步驟

    一、 實驗儀器:HG-Ⅲ型火焰光度計或HG-5型火焰光度計

    主機部分:光路控制系統,噴霧燃燒室,電子檢測系統,光學和測量系統分為鉀鈉兩套,應同時測得兩者的結果,配套件包括空氣壓縮機,分水濾氣器,煤氣穩定器,汽油汽化缸,可使用煤氣,被化石油氣,汽油等幾種燃料。

    二、實驗試劑:

    1. 鉀標準儲存液(10mol/L);取氯化鈉(GR或AR)數克,置于稱量瓶中,于120℃烤箱中干燥至恢復,取出置玻璃干燥器內冷置室溫,稱取0.7456克,用去離子水浴解,移去1000ml容量瓶中,再以去離子水稀釋至刻度,儲于塑料瓶中,置冰箱保存。

    2. 鈉標準儲存液(l00mmol/L)取氯化鈉(GR或AR)數克,在110-120℃烤箱中干燥后,取出置于玻璃干燥器內冷卻置室溫,準確稱取5.845g用去離于水溶解,移入1000ml容量瓶中,以去離子水稀釋至刻度,混勻,儲于塑料瓶中備用。

    3. 混合標本應用液(鉀 0.04mmol/L;鈉 1.4mmol/L)準確吸取鉀標準液4ml,鈉標準液14ml,置于100ml容量瓶中,以去離子水稀釋至刻度,溫勻,儲于塑料瓶中備用。

    三、實驗操作;

    l. 稀釋血清:取血清0.1ml置于大試管中,加去離子水9.9ml,充分混勻,    供鉀. 鈉測定用。

    2. 儀器準備:

    ① 連接光路,啟動空氣壓縮機,接通電源。

    ② 打開點火,調節火焰至最佳狀態。

    ③ 儀器預熱,預熱時間約二十分鐘左右。

    ④ 儀器校正,調零及調滿度。

    3. 血清樣品測定:

    鉀和鈉可同時測定,測定用去離子水重復調零及用混合標準液重復調滿度幾次,若鉀. 鈉兩個檢流計指針均無漂移,便可將稀釋過的血清樣品放在進樣管下  端開始進樣。讀取測定讀數,然后用去離子水重新進樣沖洗管道,之后進行一份  血清樣品測定。連續測試多份樣品時,應在每3-5份樣品之間進行一次標準液校正,樣品間可用去離子水調零沖洗,以排除樣品的相互干擾,持測定完畢后,用去離子水沖洗管道并關機。

    四、計算:

    (鉀樣品讀數/鉀標準液讀數)×4=血清鉀mmol/L

    (鈉樣品讀數/鈉標準液讀數)×140=血清鈉mmol/L

    參考值:血清鈉:136-145 mmol/L

    血清鉀:3.5一5.3 mmol/L

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    注意事項

    1. 火焰一定要調至最佳狀態,儀器要經預熱穩定后方可測試,否則影響讀數  數的穩定性和重復性。

    2. 使用儀器時要注意防火,且關機步驟要明確,正確的關機方法是關空氣壓縮機,讓氣焰自然熄滅,后再切斷電壓,然后關閉燃起針閥及進樣開關。

    3. 火焰光度法測鉀. 鈉時線性范圍在20ppm左右,隨濃度增加會產生自吸收現象(自蝕)而影響結果的準確性,故應將樣品稀釋,臨床上將血清稀釋100倍,兼作鉀. 鈉的測定。

    4. 儀器應保持在室溫,無強光,無震動,無塵埃的環境下,因火焰受氣壓. 流量. 燃料. 溫度的影響很大。

    5. 使用煤氣或液化石油氣時應先關燃起電源后,然后再關其他開關。

    6. 血樣樣品不能溶血。

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