純度(1)照電泳法(通則0541第五法,非還原型SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法)測定。取鑒別(4)項下供試品儲備液30μl,加非還原型供試品緩沖液10μl,混勻,置沸水浴中加熱5分鐘,作為供試品溶液。取供試品溶液15l,加至上樣孔,分離膠濃度為12.5%,用考馬斯亮藍R250染色,應顯示一條帶(2)照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品,加流動相A溶解并制成每1ml中約含蛋白質1mg的溶液色譜條件用丁基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.1%三氟乙酸的0.1%三乙胺水溶液為流動相A,以0.1%三氟乙酸的0.1%三乙胺乙腈溶液為流動相B,按下表進行梯度洗脫;檢測波長為280nm;進樣體積50l。時間(分鐘)流動相A(%)流動相B(%)測定法取供試品溶液注入液相色譜儀,記錄色譜圖限度按峰面積歸一化法計算,矛頭腹蛇血凝酶主峰面積應不低于總峰面積的95.0%分子量照電泳法(通則0541第五法,還原型SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法)測定。取鑒別(4)項下的供試品溶液與分子量對照品溶液(系列標準蛋白質分子量范圍為10K~120K,照說明書使用),照鑒別(4)項下的方法測定。本品分子量應為36000±磷脂酶A照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定。供試品溶液取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中含單位的溶液對照溶液取磷脂酶A(蜂毒),加水制成每1ml中含3.6單位的溶液。測定法取37℃預熱的卵磷脂溶液(取卵磷脂0.67g,加水適量,溶解成膠體溶液后,調節pH值至8.95,加水至100ml)2ml,置lcm吸收池中,加37℃水浴中預熱的供試品溶液或對照溶液1ml,混勻,以水代替供試品溶液,同法操作,作為空白。在546nm的波長處分別測定吸光度為A1和As,再于37℃±0.5℃水浴中保溫10分鐘,分別測定吸光度為A和As2。限度供試品溶液吸光度增加值不得大于對照溶液吸光度增加值(即每1單位供試品中磷脂酶A含量不得大于0.36單位)。單位定義:在37℃、PH8.5條件下,每分鐘使1.0mol的L-α磷脂酰膽堿(L-α-卵磷脂)水解成Lα溶血磷脂膽堿和個脂肪酸的酶量定義為1單位。L氨基酸氧化酶照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定。供試品溶液取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中含10單位的溶液。 對照溶液取L氨基酸氧化酶(東部菱背響尾蛇),加水制成每1ml中含0.056單位的溶液測定法取37℃預熱的亮氨酸溶液[取亮氨酸0.1g,3,3-二甲氧基聯苯胺6.5mg,加三羥甲基氨基甲烷-HCl緩沖液(取三羥甲基氨基甲烷1.21g,置燒杯中,加水60ml溶解,用6mol/LHCl溶液調節pH值至7.6,轉移至100ml量瓶中,用水稀釋至刻度)溶解并稀釋至100m]2.97ml,置1cm吸收池中,加37℃預熱的過氧化物酶溶液(取過氧化物酶10mg,加水溶解至10ml,臨用時配制)10l,分別加入供試品溶液或對照溶液20μl,混勻;以水代替供試品溶液,同法操作,作為空白。在436mm的波長處分別測定吸光度為A1和As,再于37℃±0.5℃水浴中保溫5分鐘,分別測定吸光度為A2和As2限度供試品溶液吸光度增加值不得大于對照溶液吸光度增加值(即每1單位供試品中L氨基酸氧化酶含量不得大于0.0056單位)。單位定義:在37℃、pH6.5條件下,每分鐘使1.0mol的L氨基酸氧化脫氨基的酶量定義為1單位磷酸酶照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液取本品,加水溶解并稀釋制成每1ml中含10單位的溶液。對照溶液取磷酸酶(小麥胚),加水制成每1ml中含0.03單位的溶液測定法取0.165%對硝基苯磷酸二鈉溶液(pH8.5)lml,分別加入供試品溶液或對照溶液0.1ml,置37℃±0.5℃水浴中保溫30分鐘,再加0.02mol/L氫氧化鈉溶液10ml,搖勻;以水代替供試品溶液,同法操作,作為空白。在400mm的波長處分別測定吸光度。限度供試品溶液的吸光度不得大于對照溶液吸光度(即每1單位供試品中磷酸酶含量不得大于0.003單位)。單位定義:在37℃、pH4.8條件下,每分鐘水解1.0ymol的對硝基苯磷酸二鈉的酶量定義為1單位神經毒取本品,加氯化鈉注射液溶解并稀釋制成每1ml中含2單位的溶液,作為供試品溶液。取體重為300~500g的鴿子3只,每1kg體重注射供試品溶液0.5ml,靜脈給藥,觀察24小時。動物不得出現神經行為異常,如步態不穩,翻正反射消失,前后肢握力減弱,抽搐,頸項強直等,或死亡;如3只鴿子中有一只出現上述神經行為異常或死亡,應另取鴿子5只復試,均不得出現神經行為異常或死亡。出血毒取本品,加氯化鈉注射液溶解并稀釋制成每lml中含50單位的溶液,作為供試品溶液。取體重18~22g的小白鼠5只,每只一側背部皮下注射0.2ml,另一側注射氯化鈉注射液0.2m作對照,注射24小時后處死動物,剝皮觀察,與對照部位相比,小鼠背部均不得有出血現象。細菌內毒素取本品,依法測定(通則1143),每1單位矛頭腹蛇血凝酶中含內毒素的量應小于50EU 異常毒性取本品,加氯化鈉注射液溶解并稀釋制成每1ml中含1.0單位的溶液,依法測定(通則1141),按靜脈注射法給藥,應符合規定