石墨爐原子吸收法測定全血中鉛的探討

    鉛（Pb），是多系統、多親和性的重金屬性的毒物，主要試嗜胎盤和嗜神經性毒物，鉛在體內任何痕量的存在即會造成傷害，如達到一定濃度，還會對兒童大腦造成不可逆轉的損害。血鉛值反映近期鉛的攝入量，常作為體內暴露水平的重要指標。世界衛生組織（WHO）規定了各類人群的血鉛生物閾限值，兒童為100ug/L。目前國家未見推薦方法，1999年，衛生部頒布了.標準編號為WS/T174-1999血鉛的酸脫蛋白──石墨爐原子吸收光譜法，我們參照此方法并改用10%（V/V）硝酸去除血中蛋白，再根據血樣粘稠進樣時容易飛濺等特點，設置了石墨爐程序升溫，分兩步干燥，解決了血樣容易飛濺的難題。為評估方法的準確性，進行了忙樣分樣，結果滿意。樣品的回收率為86%-103%，相對標準偏差RSD=4.19%。

1 實驗部分

1.1 方法原理

  全血經10%HNO₃容血和去血蛋白質后，充分振蕩高速離心沉淀。取上清液用石墨爐原子吸收光譜測定鉛含量。

1.2 儀器和試劑

1.2.1 AA-7001原子吸收儀，鉛空心吸收燈。

1.2.2血鉛標準儲備液

  濃度分別為38ug/L、112ug/L、284.2ug/L、385.7ug/L,（中國預防醫學科學院環衛所）。

1.2.3  1.5ml帶蓋聚乙烯離心管。

1.2.4  液體高速混合器，（太倉市科教器材廠）。

1.2.5  高速臺式離心機（上海醫用分析儀器廠）。

1.2.6  10%（V/V）硝酸，取10mL高純硝酸用純水稀釋到100L。

1.2.7  25 、50 、1000ul可調微量加樣器。

1.2.8  儀器工作條件

    pb測定波長283.3nm,燈電流3mA,光譜帶寬0.2nm，保護氣：氬氣。氘燈扣除背景。                    

1.3  標準曲線制作

    各取50uL鉛標準儲備液管內壁呈環狀加入事先已裝有300uL10%HNO₃的1.5帶蓋聚乙烯管中，這時濃度被稀釋7倍，標準系列濃度分別為：0.0ug/L5.43ug/L16.0ug/L40.6ug/L55.1ug/L。立即置高速液體旋渦混合器混勻30/s,放置30min后以1000rpm速度離心10min，取上清液20ml進樣，測定吸光值，繪制濃度──吸光度標準曲線，回歸方程：y=3.394×10^-3X+0.0103 r=0.9992，線性范圍5ug/L-100ug/L                  

1.4  樣品測定                            

取50uL抗凝血同標準曲線制作，然后取上清液20uL進行石墨爐分析，從標準曲線中查出對應濃渡，乘以稀釋倍數  即得血中鉛含量。        

2  結果與討論                    

2.1 升溫程序                        

由于樣品的粘度較大，干燥時容易飛濺，我們將其分為兩步干燥，并將第二部干燥時間相應延長，解決了容易飛濺。

表1石墨爐升溫程序     

程序 起始溫度（℃）終止溫度（℃） 時間（s）氣體

干燥60                  120          25      打開

干燥120             130          20      打開

灰化130             450          20      打開

灰化450             450          10      打開

灰化450             450          6        關閉

原子化2000               2000         4        關閉

清楚  2300              2300         3      打開

2.2精密度和回收率實驗

  取血樣重復測定6次，并添加標樣測定回收率，結果見表2和表3

表2精密度實驗結果（n=6）

血樣值（μg/L） 測定值（μg/L） S  RSD（%）

10.8         11.2     11.3    0.45   4.19

10.2         10.3     10.7  

表3 回收率實驗結果

血樣本底 加標量 測定次數 回收率 平均回收率 

（μg/L） （μg/L）  （n）      （%）     （%）

20.4     20     5       86.2-103.5      92.4

2.3盲樣的測定

  我們用此法測定了中國醫科院環衛所提供的質控樣，結果見表4和表5。兩組質控樣經統計學處理，其質空評估值Q<[1]，表明整體操作存在誤差較小，測試結果合格。

表4 質控實驗結果

質控樣代號  測試值（μg/L）  真值（μg/L）

   p1         116.4         118

   p2         148.5         147

   p3         318.2         314

   p4         182.2         191

   p5         80.8          87 

環衛所提供

表5 質控樣結果

質控代號  測試值（μg/L）   真值（μg/L）

1       102.8          110

2       194.4          280

3       22.3           20

4       47.2           48

5       345.2          362

6       162.5          157

環衛所提供

2.4  樣品的穩定性

   通過實驗，血羊經處理后2h穩定，因血液成分較為復雜，超過兩小時后，結果不穩定，所以血樣處理后應盡快測定。

小結

本文通過對去蛋白    石墨爐測定血鉛方法的探討摸索，根據本實驗條件對實驗條件進行了改進，證明本法具有快速準確靈敏度高等特點，加之用血量少，手指血或耳垂即可，兒童易于接受，很適用于大面積測定兒童血鉛含量。

參考文獻

[1]

  徐伯慧，閻慧芳主編.<<工作場所有害物質監測方法>>，中國人民*出版社，2003：322-323

[2]

  牛映斗.全血中鉛的石墨爐原子吸收法分析，內部資料，2002。