人體中有很多的微量元素,其各自都有自身的作用,錳就是其中之一。其可在人體中參與各種生理代謝,發揮很關鍵的作用。但如此微量元素在人體中表現為過量的時候,其又會對人體產生很大的傷害,其可對人體的神經有一定的傷害。人體會出現錐體外系受損、震顫性麻痹癥候群等表現〔1〕。所以對從事此方面工作的人員應進行定期的檢查,以了解其體內此微量元素的指標,出現問題及時處理,避免對其有重大的傷害。對此微量元素進行檢查多使用石墨爐原子吸收法進行檢查〔2-6〕,但在操作中基體改進劑的加入會造成一定程度的錳污染,所以本人提出使用硝酸-Triton溶液稀釋血樣,混勻后直接上機測試,結果令人滿意。
1 儀器及試劑儀器
美國PE公司PEAA300原子吸收光譜儀(橫向加熱石墨爐技術,帶氘燈背景較正)及錳空心陰極燈,平臺石墨管,Mn空心陰極燈(北京有色金屬研究總院)。試劑:硝酸:優級純,Mn標準溶液,國家標準物質研究中心提供;應用高純水進行此項檢查。進行檢查前所有儀器均進行消毒處理。
1.1 標本的采集過程 首先對患者進行血液標本的采集,第一滴血去掉之后再進行采集。血液標本應采集足夠,大概40μl左右。采集之后妥善進行保存,并進行充分地混勻處理,4℃保存,1周內測定。
1.2 進行檢查的環境 根據儀器的說明書進行相關檢查,可應用三種濃度進行檢查,分別為1μg/L,5μg/L,10μg/L,在進行檢查期間應重視各項環境的標準,重視檢查的溫度。
1.3 分析步驟 將Mn標準溶液(GBW080157)梯度稀釋,用硝酸-Triton溶液配制成標準濃度為10ug/L的使用液。設置儀器稀釋參數。由儀器自動計算,稀釋出標準系列1,3,7,9ug/L,并用自動進樣器吸取20μl注入石墨管中,在優化的實驗條件下,經過干燥、灰化、原子化,檢測待測元素的原子吸收信號。儀器工作條件波長:279.5nm;燈電流:15mA;峽縫:0.2nm;進樣量:20μl;保護氣:Ar,原子化時停氣;氘燈背景較正;兩步干燥,斜坡升溫。
1.4 標準曲線以稀釋液為試劑空白,將預先配好的10μg/L的標準應用液加入樣品杯,依次放進樣品盤中,經儀器自動依次稀釋成標準系列0,1,3,7,9μg/L,在上述儀器條件下測定,自動繪制標準曲線。
1.5 樣品測定取處理好的上清于樣品杯中,依據編號置于樣品盤中;另外以稀釋液為樣品空白(共5個),相同條件下測定。
1.6 計算結果最終結果為:C=m×10式中:C為樣品最終濃度(μg/L),m為樣品測定值減去樣品空白值。
2 方法的準確度
2.1 加標回收試驗取5份樣品測定時各加入4μg/L的標準5μl,回收率在95.0%-105.0%之間,平均回收率為99.2%。
2.2 錳標樣測定將國家標準物質中心提供的標準物質稀釋至4μg/L,經過50次測量,結果為4.04±0.51μg/L,經檢驗與參考值差異無統計學意義。
2.3 方法的精密度。隨機抽取3個樣品,各測量10次,變異系數(CV)依次為4.6%,5.3%和3.4%。
3 討 論
3.1 本文比較了平臺石墨管和熱解涂層石墨管,發現平臺石墨管靈敏度3倍于熱解涂層石墨管而且相對標準偏差明顯優于后者。在自動進樣過程中,要注意觀察進樣樣品必須加入平臺中。
3.2 現今,我國有明確的職業病診斷的標準,根據標準中的錳的檢查指標來對患者進行診斷和治療。對患者進行頭發和尿液的檢查只能提示患者有此方面的疾病考慮,并不可以對患者進行確診,對患者進行血液的檢查可有很高的診斷意義。患者的血液中錳的含量指標可表現出患者的人體中的毒量〔7-9〕。此項檢查可對診斷有很大的輔助作用。可是現今我國還沒有明確相關的標準。相關研究〔2-4〕顯示可使用多種的試劑來讓檢查的診斷率有所提高,這些試劑都有其自身的優勢。本文對此進行了石墨爐原子吸收分光光度法測定血錳探討,經過實驗,采用硝酸-Triton稀釋后直接進樣測定,精密度、準確度實驗,樣品分析變異系數在3.4%-5.3%之間,回收率在95.0%-105.0%之間,方法的靈敏度高,快速簡便。本方法將末梢血經過稀硝酸稀釋后,直接進樣,簡化了前處理操作和降低了外來污染。使工作量大大減少,分析時間縮短,提高了對實驗人員的保護。
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