石磊：恒溫PCR技術在食品安全檢測領域的應用

　　2014年7月31日，第二屆國際檢驗檢測技術與裝備博覽會在北京國家會議中心隆重召開（以下簡稱檢博會）。本屆博覽會以“高端技術，服務民生”為主題，以“質檢、科技、國際”為特色，秉著“搭建國際平臺，服務檢測市場”的宗旨，為科技服務水平提升、檢驗檢測行業和諧發展、科技成果交流與合作、檢驗檢測儀器拓展市場提供一個國際平臺。

　　在31日下午開展的食品檢測專題技術交流會上，國家“千人計劃”特聘專家、廣州迪澳生物科技公司首席技術官石磊教授為大家帶來《恒溫PCR技術在食品安全檢測領域的應用》的專題報告。

國家“千人計劃”特聘專家、廣州迪澳生物科技公司首席技術官石磊教授

　　進入21世紀以來，感染性疾病仍然是危害人類健康的重大隱患，新發病原問題突出，包括SARS、禽流感、豬鏈球菌感染人類和牛炭疽感染人類事件，這就對病原的檢測盒診斷提出了更高的要求。

　　根據柯赫氏法則假設，表型或基因應與病原體相關聯、基因的特殊失活會損失毒性、逆轉或等位基因替代突變基因有助于恢復其致病性、基因產物可以誘導并中和抗體。

　　石磊教授向大家介紹了致病微生物檢測現狀——食品中沙門氏菌檢測的國家標準，并指出常規的病原檢測技術存在一定局限性，病原培養分離方法存在費時費力無法滿足高效快速要求、培養困難或無法培養大部分病毒沒有可靠培養手段、經驗依賴高等不足。在另一方面目前主流PCR設備局限于高端市場、普及推廣困難，基層醫療和檢測機構需求得不到滿足，傳統PCR方法具有設備昂貴、基礎設施投入大、專業人員要求高和操作復雜等缺陷。

　　石磊教授提出了病原快速檢測的技術革新——通過恒溫PCR進行分子檢測。創新核心技術即簡易高效的核酸擴增新技術，設備簡便、快速準確，通過新型恒溫擴增分子檢測平臺，將反應全過程恒定63℃，操作簡單易于推廣是分子檢測技術的又一次革命。

　　分子檢測方法優勢

　　1.檢測時間短、效率高：最快1h內出結果；

　　2.結果準確：特異的檢測目標，結果判讀客觀；

　　3.適用面廣：無法培養的病原只能用分子方法檢測；

　　石磊教授在報告中指出恒溫PCR與傳統PCR相比，恒溫擴增——無需熱循環、持續擴增；酶——Bst DNA聚合酶高效擴增；引物設計——自我配對、自主擴增；反應底物濃度高——提高低拷貝模板的擴增概率。同時介紹迪澳恒溫分子檢測法——引物設計，通過特殊的引物設計可以保障檢測特異性；介紹了其核心技術原理、高活性聚合酶（高活性-鏈置換DNA聚合酶、63℃的DNA復性和延伸）。

　　石磊教授還指出了恒溫擴增法應用存在一定障礙，結果判讀操作復雜、結果記錄不方便、需要對產物進行后分析污染風險大。

　　最后介紹了迪澳技術平臺，國內首創的恒溫熒光檢測儀和恒溫熒光檢測試劑盒，恒溫PCR為PCR技術推廣應用創造了全新的空間，可用于動物源性食品檢測、轉基因農產品檢測、畜禽水產病害檢測等。