有兩個方法可以測定（標定）：
方法一：
準確量取一定體積的重鉻酸鉀標準溶液，加入一定體積的3mol/L硫酸，加入2-3gKI，溶解搖勻放暗處5min，用硫代硫酸鈉溶液滴定至淡黃色（少量碘存在），加淀粉溶液，呈深藍色，繼續滴定至藍色剛消失，記下硫代硫酸鈉溶液體積，按下式計算其濃度
6 C(K2Cr2O7) V(K2Cr2O7) = C(Na2S2O3) V(Na2S2O3)
方法二：
準確量取一定體積的碘標準溶液，加入醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（或NH4HF2緩沖溶液），用硫代硫酸鈉溶液滴定至淡黃色，加淀粉，繼續滴定至藍色剛消失，記下硫代硫酸鈉溶液體積，按下式計算其濃度
2 C(I2) V(I2) = C(Na2S2O3) V(Na2S2O3)