鑒別
(1)照薄層色譜法(通則0502)試驗供試品溶液取本品適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含依替米星50mg的溶液對照品溶液取依替米星對照品適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含依替米星50mg的溶液。系統適用性溶液取慶大霉素C1適量,加供試品溶液溶解并稀釋制成每1ml中含慶大霉素C13約2mg的溶液。色譜條件采用硅膠G薄層板,以三氯甲烷甲醇氨水(5:3:1.5)為展開劑。測定法吸取上述三種溶液各21,分別點于同一薄層板上,展開后,晾干,于110℃加熱約10分鐘,放冷,置碘蒸氣中顯色至斑點清晰。系統適用性要求系統適用性溶液應顯兩個完全分離的清晰斑點。結果判定供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液主斑點的位置和顏色相同。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致(3)本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應(通則0301)。以上(1)、(2)兩項可選做一項。
檢查
酸度取本品,加水制成每1ml中含50mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為4.0~6.5。溶液的澄清度與顏色取本品5份,分別加水制成每1ml中含75mg的溶液,溶液應澄清無色;如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃;如顯色,與黃色或黃綠色2號標準液(通則0901第一法)比較,均不得更深。硫酸鹽照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.5mg的溶液對照品溶液(1)精密量取硫酸滴定液適量,用水定量稀釋制成每1ml中約含硫酸鹽(SO4)0.075mg的溶液。對照品溶液(2)精密量取硫酸滴定液適量,用水定量稀釋制成每1ml中約含硫酸鹽(SO4)0.15mg的溶液。對照品溶液(3)精密量取硫酸滴定液適量,用水定量稀釋制成每1ml中約含硫酸鹽(SO4)0.30mg的溶液。系統適用性溶液與色譜條件見有關物質(第二法)項下。系統適用性要求見有關物質(第二法)項下。對照品溶液(1)~(3)色譜圖中,以對照品溶液濃度的對數值與相應峰面積的對數值計算線性回歸方程,相關系數(r)應不小于0.99。測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液(1)~(3),分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖限度用線性回歸方程計算供試品中硫酸鹽(SO4)的含量。按無水物計算應為31.5%~35.0%。有關物質第一法照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中約含依替米星0.25mg的溶液。對照溶液精密量取供試品溶液1ml,置100ml量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻系統適用性溶液取依替米星對照品和奈替米星標準品各適量,加流動相溶解并稀釋制成每1ml中各約含0.025mg的混合溶液。靈敏度溶液精密量取對照溶液適量,用流動相定量稀釋制成每1ml中約含依替米星0.25μg的溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(4.6mm×250mm,5μm或效能相當的色譜柱),以0.2mol/L三氟醋酸溶液(含0.05%五氟丙酸,1.5g/L無水硫酸鈉,0.8%(V/V的50%氫氧化鈉溶液,用50%氫氧化鈉溶液調節pH值至3.5)-乙腈(96:4)為流動相,流速為每分鐘1.0ml,柱溫為35℃,用積分脈沖安培電化學檢測器檢測,檢測電極為金電極(推薦使用3mm直徑),參比電極為Ag/AgCl復合電極,鈦合金對電極,四波形檢測電位(見下表),柱后加堿(50%氫氧化鈉溶液1→25,推薦流速每分鐘0.5m1);進樣體積25l。時間(秒鐘)電位(V)積分+0.10開始0.40+0.10結束0.43+0.600.100,10系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,依替米星峰和奈替米星峰之間的分離度應大于4.0。靈敏度溶液色譜圖中,依替米星峰峰高的信噪比應大于10。測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的3倍。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,奈替米星按校正后的峰面積計算(乘以校正因子0.8),不得大于對照溶液主峰面積的2.5倍(2.5%),其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的2.5倍(2.5%),各雜質校正后峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的5倍(5.0%),小于靈敏度溶液主峰面積的峰忽略不計。第二法照高效液相色譜法(通則0512)測定供試品溶液取本品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含依替米星2.0mg的溶液。對照溶液取依替米星對照品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含依替米星2.0mg的溶液 對照溶液(1)精密量取對照溶液適量,用水定量稀釋制成每1ml中含依替米星20μg的溶液對照溶液(2)精密量取對照溶液適量,用水定量稀釋制成每1ml中含依替米星50g的溶液對照溶液(3)精密量取對照溶液適量,用水定量稀釋制成每1ml中含依替米星0.lmg的溶液。系統適用性溶液取依替米星對照品與奈替米星標準品各適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中各含0.2mg的混合溶液色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(pH值范圍0.8~8.0);以0.2mol/L三氟醋酸溶液甲醇(84:16)為流動相;流速為每分鐘0.5ml;用蒸發光散射檢測器檢測(參考條件漂移管溫度100℃,載氣流速為每分鐘26L);進樣體積20l系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,依替米星峰與奈替米星峰之間的分離度應大于1.2。對照溶液(1)~(3)色譜圖中,以對照溶液濃度的對數值與相應峰面積的對數值計算線性回歸方程,相關系數(r)應不小于0.99。測定法精密量取供試品溶液與對照溶液(1)~(3),分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2倍。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰(硫酸峰除外)用線性回歸方程計算,單個雜質不得過2.5%,雜質總量不得過5.0%,小于對照溶液(1)主峰面積0.02倍的峰忽略不計。殘留溶劑照殘留溶劑測定法(通則0861第二法)測定供試品溶液取本品約0.12g,精密稱定,置頂空瓶中,精密加水3ml使溶解,密封對照品溶液取二氯甲烷適量,精密稱定,用甲醇定量稀釋制成每1ml中約含1.0mg的溶液,精密量取適量,用水定量稀釋制成每1ml中含24μg的溶液,精密量取3ml,置頂空瓶中,密封。色譜條件以5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷(或極性相近)為固定液的毛細管柱為色譜柱,初始溫度為50℃,保持5分鐘,以每分鐘35℃的速率升至200℃;檢測器溫度為260℃;進樣口溫度為120℃。頂空瓶平衡溫度為85℃,平衡時間為30分鐘測定法取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣,記錄色譜圖。限度按外標法以峰面積計算,二氯甲烷的殘留量應符合規定。水分取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過10.0%。熾灼殘渣取本品1.0g,依法測定(通則0841),遺留殘渣不得過0.5%。重金屬取熾灼殘渣項下遺留的殘渣,依法檢查(通則0821第二法),含重金屬不得過百萬分之二十可見異物取本品5份,用微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0904),應符合規定。(供無菌分裝用)不溶性微粒取本品3份,用微粒檢查用水制成每1ml中含60mg的溶液,依法檢查(通則0903),每1g樣品中,含 10ym及10m以上的微粒不得過6000粒,含25m及25m以上的微粒不得過600粒。(供無菌分裝用)細菌內毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1mg依替米星中含內毒素的量應小于0.50EU。(供注射用)
性狀
本品為白色或類白色粉末或疏松固體;無臭;極具引濕性。本品在水中極易溶解,在甲醇、丙酮和冰醋酸中幾乎不溶比旋度取本品,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50mg的溶液,依法測定(通則0621),比旋度為100°至+115°