比色法：這種方法利用酶促反應產生的游離酚或其衍生物與特定試劑發生顏色反應，然后通過分光光度計測定反應混合物的吸光度來評估酶活性。例如，堿性磷酸酶（ALP）可以通過在堿性條件下使磷酸苯二鈉水解生成游離酚，再與4-氨基安替比林反應并形成醌類化合物，其顏色的深淺與ALP活性成正比。
連續監測法：這種方法是在堿性條件下，使磷酸對硝基苯酚（4-NPP）釋放出磷酸基團，AMP參與磷酸酰基的轉移，促進酶反應速率，生成游離的對硝基苯酚（4-NP），并形成黃色的醌，其吸光度的增高速率與酶活力成正比。
