神經細胞培養前怎樣用多聚賴氨酸包被6孔板。
第一天:
1. 在培養板中將已爬好細胞的玻片用PBS浸洗3次,每次3min;
2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min, PBS浸洗玻片3次,每次3min;
3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室溫通透20min(細胞膜上表達的抗原省略此步驟);
4. PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水紙吸干PBS,在玻片上滴加正常山羊血清,室溫封閉30min;
5. 吸水紙吸掉封閉液,不洗,每張玻片滴加足夠量的稀釋好的一抗并放入濕盒,4℃孵育過夜;
第二天:
6. 加熒光二抗: PBST 浸洗爬片3次,每次3min,吸水紙吸干爬片上多余液體后滴加稀釋好的熒光二抗,濕盒中20-37℃孵育1h,PBST浸洗切片3次,每次3min;
注意:從加熒光二抗起,后面所有操作步驟都盡量在較暗處進行。
7. 復染核:滴加DAPI避光孵育5min,對標本進行染核,PBST 5min×4次洗去多余的DAPI;
8. 用吸水紙吸干爬片上的液體,用含抗熒光淬滅劑的封片液封片,然后在熒光顯微鏡下觀察采集圖像。
聚賴氨酸是一種天然微生物類食品防腐劑,具有抑菌譜廣、抑菌能力強、耐高溫、水溶性好、不影響食品風味和安全性高等優點,在方便米飯、濕熟面條、海產品、醬類等食品及醫藥領域中廣泛應用。近日,中國科學院過程工程......
作為一種天然微生物類食品防腐劑,聚賴氨酸具有抑菌譜廣、抑菌能力強、耐高溫、水溶性好、不影響食品風味和安全性高等優點,在方便米飯、濕熟面條、海產品、醬類等食品及醫藥領域中廣泛應用。近日,中國科學院過程工......
作為一種天然微生物類食品防腐劑,聚賴氨酸具有抑菌譜廣、抑菌能力強、耐高溫、水溶性好、不影響食品風味和安全性高等優點,在方便米飯、濕熟面條、海產品、醬類等食品及醫藥領域中廣泛應用。近日,中國科學院過程工......