實驗方法原理 離子交換層析可用于濃縮蛋白質溶液。因為大多數蛋白質的等電點均低于 8, 所以它們可在 pH 值為 8 的弱離子強度溶液中被陰離子交換樹脂吸附。用離子強度大的溶液可簡單的將它們洗脫下來,達到濃縮的目的。
實驗材料 蛋白質溶液
儀器、耗材 離子交換樹脂層析柱
實驗步驟
1. 準備離子交換樹脂,裝配層析柱,或采用批量層析。1 ml 樹脂可濃縮 20 mg 蛋白質;
2. 用 20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0),20 mmol/L NaCl 溶液平衡樹脂;
3. 加入樣品;
4. 使兩倍于樹脂體積的 20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0),20 mmol/L NaCl 溶液流過樹脂;
5. 用 20 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0),1 mol/L NaCl 溶液洗脫蛋白質。