離子阱質譜在高質量范圍內測定寡糖化合物（一）

前言

近年分子生物學、細胞生物學和生物化學等的發展使人們不斷認識到糖類物質除儲能之外還有其它諸多生物學功能，同時大量的實驗結果也揭示了糖類物質是重要的信息分子，參與許多生理和病理過程。其中寡糖由于單糖分子、寡糖素結合位置和結合類型的不同，使得種類繁多，功能各異，寡糖的結構與組成直接決定了其生物學功能，鑒于糖綴合物上寡糖鏈在生命過程中的重要作用，展開寡糖鏈的結構分析是非常重要的。糖類的分析方法常規的有苯酚硫酸法、二硝基水楊酸法等化學方法，隨著現在分析技術的進步，幾種先進的物理學方法己經應用到寡糖的分析上來，如氣相色譜法（GC）、高效液相色譜法（HPLC）和毛細管電泳法（CE）。這些方法分離能力高，方法靈敏快速。此外紅外(IR)、核磁共振(1H-NMR,13C-NMR,COSY等)、質譜(MS)等方法也運用到了糖類結構分析中，使糖的分析方法有了質的飛躍。質譜是目前寡糖序列分析的常用方法之一。由于其靈敏度高，藥品用量少，在糖分析中得以廣泛應用。質譜不僅可用于提供寡糖的分子量信息，而且可以確定單糖殘基間的連接順序。近年來，快原子轟擊質譜(FAB-MS)、電噴霧電離質譜(ESI-MS)，基質輔助基光解吸質譜(MALDI-MS)在測定糖的分子量和糖鏈的一級結構方面得到廣泛的應用。　本文中LTQ二維線性離子阱質譜儀在高質量端（m/z200-4000）具有很高的全掃描靈敏度，可以滿足寡糖類樣品對寬質量范圍的需求。由于儀器正常使用的質量范圍是50-2000（m/z），故對200-4000(m/z)質量段需要進行附加的校正。

實驗條件

2.1 試劑和樣品

PPG2700校正標樣購于Sigma公司

寡糖類混合物 客戶提供標準品

寡糖類混合物衍生物 客戶提供

甲醇( 色譜純， 德國Merck)

乙腈( 色譜純， 德國Merck)

0.1%乙酸(優級純，Merck)

2.2 質譜條件

Syringe Pump Flow Rate：5ul/Min

Spray Voltage: 4300 V

Sheath Gas: 5 Arb

Aux Gas: 0 Arb

Capillary Temperature: 270℃

Capillary Voltage：20 V

Tube Lens：200 V

對于高質量校正，以下參數需要特別設定

Sheath Gas: 30 Arb

Capillary Temperature: 350℃

Source Fragment: 20V

Tube Lens: 200V