millipore超濾離心管想重復使用,請問如何清洗和保存?
最近使用超濾管,由于管子較貴,想重復用幾次,但找不到可靠的資料。不知如何清洗和保存,比如有人說用疊氮化鈉,有人說用氫氧化鈉,有人說用乙醇浸泡。莫衷一是。很急用。
【回答精要】
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。
這個我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會增大,基本就是5-10KD最大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應該沒問題。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應該沒有問題。
看看說明書不就結了。我原來在CRO的時候一直是重復用的,也沒見什么不好。
短期會用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個月以內不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長時間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個東西強致癌物,不建議使用。
理論上截留目標物,孔徑應選1/3~1/5的膜;透過目標物,孔徑應選5-10倍的膜。