【產品簡介】禽流感H5，H9，雞新城疫病毒ELISA檢測試劑盒用于免疫新城疫疫苗后的抗體動態水平監測，指導免疫預防工作，評估雞場禽流感H5，H9，雞新城疫病毒疫苗免疫狀況，也可用于該病的流行病學調查。
【產品內容】
試劑盒主要成分 | 數量 |
包被板 | 96T×1 |
陽性對照 | 1ml×1 |
陰性對照 | 1ml×1 |
酶標結合物 | 10ml×1 |
樣品稀釋液 | 20ml×1 |
底物液 | 10ml×1 |
終止液 | 10ml×1 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1 |
封口膠 | 1份 |
使用說明書 | 1份 |
【成分性狀】
包被板 | 96孔塑制微孔板，無色透明，干燥，無雜質吸附 |
酶標結合物 | 略帶黃色澄明液體 |
陰、陽性對照 | 略帶黃色澄明液體 |
樣品稀釋液 | 無色或略帶黃色澄明液體 |
濃縮洗滌液 | 無色或略帶黃色澄明液體 |
底物液 | 無色或微藍色澄明液體 |
終止液 | 無色澄明液體，低溫條件下可能會出現絮狀沉淀 |
【用法與判定】
1、需要自備的器材
1.1微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的槍頭；
1.3 用來稀釋洗滌液的500ml量筒；
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀；
1.5 用于稀釋樣品的1.5ml Ep管；
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進行100倍稀釋（建議：2μl血清樣品加入198μl樣品稀釋液中），樣品加入包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意：①制備血清用的血液樣本應無溶血現象發生；②不能稀釋陰性、陽性對照。
3、操作步驟（﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻，所有試劑應恢復至室溫）
3.1 在A1和A2孔中分別加入100μl陰性對照；
3.2 在A3和A4孔中分別加入100μl陽性對照；
3.3 取100μl經1：100稀釋好的待檢樣品加入相應孔中，并做好記錄；
3.4 37℃孵育1h；
3.5 將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶，需先溶解后，方可進行稀釋）進行洗板，重復5次，每次30s；
﹡加液時防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果，盡量將孔內洗滌液拋甩干凈；
3.6 每孔加100μl酶標結合物；
3.7 37℃孵育1h；重復步驟3.5；
3.8 每孔加100μl底物液；
3.9 37℃孵育10min（避光顯色）；
3.10 每孔加100μl的終止液；
3.11 立刻于450nm波長處測定各孔的吸光度值，即OD450值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照孔OD450值≤0.2；
4.2陽性對照：正常情況下，陽性對照孔OD450值≥0.4；
4.3臨界值(C.O.)計算：臨界值=0.20+陰性對照均值；陰性對照OD450值大于0.2時應舍棄，如所有陰性對照OD450值均大于0.2時須重復實驗；陰性對照低于0.05時以0.05計算。
4.4結果判定： 檢測樣品OD450值≥臨界值，判定該檢測樣品為陽性； 檢測樣品OD450值＜臨界值，判定該檢測樣品為陰性。
【注意事項】
（1）待檢血清樣品數量過多時，應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后，再統一將血清樣品加入酶標板中，使反應時間一致。
（2）試劑盒使用的過程中不要吸煙、喝水和吃東西。
（3）底物液和終止液對皮膚有刺激性，注意防護。
（4）底物液不要暴露于強光和任何氧化劑；使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
（5）所有試劑應在2～8℃存放；使用前恢復到室溫，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止試劑盒組分受到污染。
（7）不要使用超過有效期的試劑，不同批次試劑盒的組分不要混用。
（8）操作過程中的移液、時間和洗滌必須精確。
【規格與包裝】96T×1
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為6個月