(1)對于弱酸,流動相的pH值越小,組分的k值越大。當pH值遠低于弱酸的PKA值時,弱酸主要以分子形式存在。在分析弱酸樣品時,通常在流動相中加入少量的弱酸,通常使用50 mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液。
(2)對于軟弱地基,則相反。在弱堿樣品的分析中,通常會在流動相中加入少量的弱堿。常用50 mmol/L磷酸鹽緩沖液和30 mmol/L三乙胺溶液,因此,在這種情況下,有機胺(如三乙胺)也被稱為去尾劑或清除劑。
(3)含緩沖鹽的流動相的制備和緩沖鹽中鹽試劑的使用也應盡可能使用高效液相色譜儀的色譜純度,稱重應準確。為了滿足要求,在日常使用前,應選擇合適的天平,并對天平進行校準。按要求配置后,必須用0.4 5μm或0.2 2μm濾膜過濾,超聲波除氣2 0 min以上。注:緩沖鹽應為新制備的。