1.臨床癥狀
以下癥狀至少3項以上陽性：①發熱；②咽炎、扁桃體炎；③頸部淋巴結腫大（大于1cm）；④肝大；⑤脾大。
2.血象檢查
（1）白細胞分類淋巴細胞>50%或淋巴細胞總數≥5.0×109/L；
（2）異型淋巴細胞≥10%或總數≥1.0×109/L。
3.EB病毒抗體檢查
急性期EB核抗原陰性，并有以下之一項：
（1）抗VCA-IgM抗體初期陽性，以后轉陰；
（2）雙份血清抗VCA-IgG抗體滴度4倍以上升高；
（3）EA抗體一過性升高；
（4）VCA-IgG抗體初期陽性；EB病毒核抗原抗體后期陽轉。
4.EB病毒DNA檢查
血液、唾液、口咽上皮細胞、尿液或組織中的EB病毒DNA陽性。
5.EB病毒抗原檢查
鼻咽拭子直接測定抗原陽性
符合上述臨床癥狀和血象檢查，同時具備第3～5項之一，可確診。