取本品適量,精密稱定,加0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含1.2mg的溶液,作為供試品溶液,精密量取適量,用0.1 mol/L鹽酸溶液定量稀釋制成每1 mL中含2.4 μg的溶液,作為對照溶液。另精密稱取雜質A對照品約18mg,置100 mL量瓶中,加6 mol/L氨溶液1 mL與水適量使溶解,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取2 mL,置100 mL量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,作為雜質A對照品溶液。照高效液相色譜法(附錄V D)試驗,用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以醋酸銨高氯酸鈉溶液(取醋酸鈸4.0 g和高氯酸鈉7.0 g,加水1300 mL使溶解,用磷酸調節pH值至2.2)-乙腈(85:15 )為流動相A,乙腈為流動相B:進行線性梯度洗脫。柱溫為40℃;流速為每分鐘1 mL。稱取氧氟沙星對照品、環丙沙星對照品和雜質E對照品各適量,加0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1 mL中約含氧氟沙星1.2mg、環丙沙星和雜質E各6 μg的混合溶液。取10 μL注入液相色譜儀,以294 nm為檢測波長,記錄色譜圖,氧氟沙星峰的保留時間約為15分鐘。氧氟沙星峰與雜質E峰和氧氟沙星峰與環丙沙星峰的分離度應分別大于2.0與2.5。取對照溶液10 μL注入液相色譜儀,以294mn為檢測波長,調節檢測靈敏度,使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%。精密量取供試品溶液、對照溶液和雜質A對照品溶液各10μL,分別注入液相色譜儀,以294nm和238nm為檢測波長,記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,雜質A(238nm檢測)按外標法以峰面積計算,不得過0.3%,其他單個雜質(294nm檢測)峰面積不得大于對照溶液主峰面積(0.2% ),其他各雜質峰面積的和(294nm檢測)不得大于對照溶液主峰面積的2.5倍(0.5% ) 。供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積0.1倍的峰可忽略不計。