1.卡那霉素可加強本藥對大腸桿菌、變形桿菌和腸桿菌屬的體外抗菌作用。
2.慶大霉素可加強本藥對B組鏈球菌的體外殺菌作用。
3.丙磺舒可使氨芐西林在腎中清除變緩，升高其血藥濃度。
4.與華法林同用可加強華法林的抗凝血作用。
5.與氯霉素聯用，在體外對流感桿菌的抗菌作用影響不一。氯霉素在高濃度(5～10μg/mL)時對本藥無拮抗現象，在低濃度(1～2μg/mL)時可使氨芐西林的殺菌作用減弱，但對氯霉素的抗菌作用無影響。且兩藥合用于治療細菌性腦膜炎時，遠期后遺癥的發生率比兩藥單用時高。
6.林可霉素可抑制本藥在體外對金黃色葡萄球菌的抗菌作用。
7.別嘌醇可使本藥皮膚粘膜反應發生率增加，尤其多見于高尿酸血癥患者。
8.與避孕藥同用，可刺激雌激素代謝或減少其腸肝循環，降低口服避孕藥的藥效。
9.與傷寒活疫苗同用，可減弱傷寒活疫苗的免疫效應，可能的機制是本藥對傷寒沙門菌有抗菌活性。