配伍注意：本品注射劑，遇強堿性及強酸性溶液，易被破壞失效。
（1）大環內酯類和林可霉素類抗生素的抗菌作用機理與氯霉素相似，可替代或阻止氯霉素與細菌核糖體的50s亞基相結合，故兩者同用可發生拮抗而不宜聯合應用。
（2）氯霉素是抑制細菌蛋白質合成的抑菌劑，對青霉素類殺菌劑的殺菌效果有干擾作用。應避免兩類藥物同用。
（3）氯霉素能拮抗維生素B6，使機體對B6的需要量增加，亦能拮抗維生素B12的造血作用。
（4）氯霉素對肝臟微粒體的藥物代謝酶有抑制作用，能影響其他藥物的藥效，如顯著延長動物的戊巴比妥鈉麻醉時間等。
（5）本品與某些抑制骨髓的藥物如秋水仙堿、保泰松和青霉胺等同用，可增加毒性。