試驗方法：挑取新的待試純培養物少許，接種于通用培養基，培養于36±1°C或30°C(以30°C較好)3-5天，從第二天起，每日取培養液1ml，加甲基紅指示劑1-2滴，陽性呈鮮紅色，弱陽性呈淡紅色，陰性為黃色。迄至發現陽性或至第5天仍為陰性、即可判定結果。
甲基紅為酸性指示劑，pH范圍為4.4-6.0，其pK值為5.0。故在pH5.0以下，隨酸度而增強紅色，在pH5.0以上，則隨堿度而增強黃色，在pH5.0或上下接近時，可能變色不夠明顯，此時應延長培養時間，重復試驗。
