1.血清蛋白測定
不同種類蛋白質常采用不同方法測定。白蛋白、球蛋白等常用化學法和電泳法進行測定,纖維蛋白原常用熱沉淀比濁法測定,甲胎蛋白常采用酶聯免疫吸附法或放射免疫分析法等進行測定。
2.血清酶測定
常檢測血清中的轉氨酶、堿性磷酸酶、γ-谷氨酰轉移酶、單胺氧化酶等,一般應用賴氏比色法和速率法檢測。目前臨床常用速率法,多采用半自動分析儀進行測定,取血清、相應底物緩沖液,立即吸入自動分析儀,在37℃環境中孵育,在特定波長下比色,進行吸光度測定,計算相應酶的活性。
3.血清膽紅素測定
通常采用重氮試劑法或膽紅素氧化酶法進行血清膽紅素測定,按測定物質的種類在試管中加入血清和相應的試劑,混合后在特定波長下比色,讀取各管吸光度,比對確定相應膽紅素濃度。
4.血清膽汁酸測定
常用測定方法有高效液相色譜法、放射免疫分析法、酶免疫分析法、膽酸酶比色法,其中膽酸酶比色法簡便、快速,可手工操作,也能進行自動化分析,是臨床實驗室常用的血清膽汁酸測定方法,具體操作為:在試管中加入血清和含有酶的特制試劑,混合后在特定波長下比色,讀取各管吸光度,計算膽汁酸濃度。
5.血氨測定
方法有微量擴散法、離子交換法、谷氨酸脫氫酶法和氨離子選擇電極法,其中微量擴散法已淘汰,目前應用最多的是谷氨酸脫氫酶法,在試管中加入血清、a-酮戊二酸和還原型輔酶Ⅱ,最后加入谷氨酸脫氫酶,血氨的下降速率與血氨濃度成正比,在特定波長處測定吸光度,與同樣處理的標準管比較,計算血氨含量。
6.凝血因子測定
(1)凝血酶原時間(PT):待測血漿加入過量的含鈣組織凝血活酶,重新鈣化的血漿在組織因子存在時通過外原性激活途徑激活因子X成Xa, Xa使凝血酶原轉變為凝血酶,凝血酶使纖維蛋白原轉化為纖維蛋白而凝固,測定凝固所需時間即為凝血酶原時間。
(2)活化部分凝血活酶時間(APTT):待測血漿加入凝血活酶,在鈣離子的參與下纖維蛋白轉化為不溶性的纖維蛋白而凝固,測定凝固所需要的時間即為活化部分凝血活酶時間。
(3)凝血酶時間測定(TT):待測血漿加入適量凝血酶,纖維蛋白原轉化為不溶性的纖維蛋白而凝固,測定所需時間即為凝血酶時間。
(4)纖維蛋白原濃度測定:高濃度的凝血酶存在時,待測稀釋血漿的凝固時間與其纖維蛋白原含量成反比關系。測量該稀釋血漿凝固時間,換算即得纖維蛋白原濃度。
7.血清前白蛋白測定
常用測定方法有醋酸纖維素薄膜電泳法、免疫擴散法及散射比濁法。