阿德福韋酯在細胞內被磷酸激酶轉化為了具有抗病毒活性的二磷酸鹽，通過對天然底物二脫氧三磷酸腺苷的競爭作用，抑制HBV聚合酶（逆轉錄酶），吸收且摻入到病毒DNA，中止其DNA鏈的延長，由此抑制HBV的復制。其對宿主DNA聚合酶α和γ有輕微的抑制作用。體外對HBV轉染肝細胞的IC50是0.2至2.5μM。對于HBV YMDD變異毒株，阿德福韋酯與拉米夫定無交叉耐藥性。
