類天花病毒PCR進口試劑盒使用說明

特點：

1. 改進了DOP-PCR的循環參數。

2. 優化的引物濃度，使自連序列和非模板相關序列的合成。

3. 可使用各種來源的樣品，包括全血，干血，發根，口腔粘膜刮液培養細胞，真菌和病毒等。

4. 操作簡便快捷，恒溫（30℃）反應，無須PCR儀即可實現擴增。

5. 產物可用于多種后續試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異，微衛星差異，SNP，STR）等。

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運輸】：

u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；

u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；

u 運輸：采用或泡沫箱加冰密封進行運輸。

【自備試劑】:

核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

【使用方法】:

注：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區）

取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。