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  • 發布時間:2021-05-22 09:57 原文鏈接: 類風濕關節炎相關抗體檢測及意義

    一.類風濕因子(Rheumatoid Factor, RF)
    RF是抗人或動物IgG分子的FC片段的抗體。作為一種抗體,其抗免疫球蛋白類型可分為IgG-RF、IgM-RF和IgA-RF等。RF不僅與變性的IgG分子反應,也可同自身IgG或異體IgG分子反應,并且與其他抗原如核蛋白發生交叉反應。在類風濕關節炎患者的血清和滑液中可測出19sIgM-RF、7sIgM-RF和7sIgG-RF,這三種RF可相互發生反應,后二者主要參與關節外癥狀的免疫復合物。
    RF產生于外周淋巴結、關節滑膜、扁桃體淋巴濾泡和骨髓等。B淋巴細胞的激活,尤其CD5+B淋巴細胞是產生IgM-RF主要細胞。
    測定RF的方法常有乳膠凝集法及綿羊紅細胞凝集法(SCAT),這兩種方法的檢測符合率在90%以上,SCAT法的敏感性不如乳膠凝集法,但特異性較高。乳膠凝集法和SCAT法均只能測出19sIgM-RF。IgG-RF、IgA-RF和7sIgM-RF則需用ELISA法測定。RF在類風濕關節炎中陽性率為80%左右,是診斷RA的重要血清學標準之一,但不是唯一的標準,因5%的正常老年人RF可陽性,隨年齡的增高,陽性率可增高,年齡超過75歲的老年人,RF假陽性率為2-25%不等。且在許多其他疾病中出現,如自身免疫性疾病:干燥綜合征、SLE、PSS、PM/DM等;感染性疾病:細菌性心內膜炎、結核、麻風、傳染性肝炎、血吸蟲病等;非感染性疾病:彌漫性肺間質纖維化、肝硬化、慢活肝、結節病、巨球蛋白血癥等。
    持續高滴度的RF,常提示RA的疾病活動,且骨侵蝕發生率高。有學者指出,健康成年人高滴度IgM-RF是發生RA的危險因子。
    臨床上RF常作為區分血清陰性脊柱關節病的標準。必須明確,部分RA患者測不出IgM-RF,應進一步檢測IgG-RF和IgA-RF,這兩種類型RF對IgG分子特異性強,而不易與其他非相關抗原反應。RF滴度越高,對RA的診斷特異性越高。對RF陰性,且臨床上高度疑似RA的患者,還可進行免疫復合物中RF的測定,即可將循環免疫復合物經酸化高濃度氯化鈉,或高度稀釋分離后測RF,這稱為隱性RF,尤其在幼年型類風濕關節炎(JRA)患者中陽性率較高。
    二.抗核周因子
    抗核周因子(antiperinuclear  factor,APF)是1964年荷蘭學者Nienlucis和Mandema用夾粘膜細胞作為底物檢測抗核抗體(ANA)時,偶然發現細胞核周圍有均質型的4~7μm熒光顆粒,稱之為抗核周因子(APF)。進一步研究發現APF主要出現在RA患者血清中,而少見于SLE等非RA的風濕性疾病患者及正常人。APF是一種RA特異性的免疫球蛋白,且以IgG型為主。APF對RA診斷的特異性高達90%以上。是早期診斷RA的有效指標之一。檢測APF主要采用間接免疫熒光法(IIF)。
    三.抗角蛋白抗體
    抗角蛋白抗體(antikeratin  antibody,AKA)是1979年Young等人發現RA血清中有一種與大鼠食管角質層成分起反應的抗體,且發現該抗體對RA診斷有較高特異性。AKA的檢測方法目前主要采用間接免疫熒光法。研究發現,AKA對于診斷RA的特異性很高(90%左右),初步證實AKA與RA關節壓痛數、晨僵時間和CRP有關。AKA與RF、抗RA33/RA36抗體、抗Sa抗體等無交叉反應及相關性,因此,該抗體的檢測可以對RF陰性或抗RA33/RA36抗體陰性、抗Sa抗體陰性的患者提供另一個診斷指標。臨床研究還表明,AKA與疾病嚴重程度和活動性相關,在RA早期甚至臨床癥狀出現之前即可出現,因此,它是RA早期診斷和判斷預后的指標之一。該抗體在患者滑液中陽性率與血清基本一致,但程度明顯高于后者,提示AKA可能在滑液局部合成并對滑膜炎的形成起重要作用。
    四.抗Sa抗體
    抗Sa抗體是以患者Savoic名字命名的一種新型自身抗體。Sa抗原最早在人脾中發現,后又發現Sa抗原存在于人的胎盤及類風濕滑膜翳中,推斷Sa抗原可能存在于正常人體組織中,是人體的正常組成成分。抗Sa抗體的產生機制尚不清楚。Despres等人首先報道了該抗體對RA具有診斷特異性,在未經選擇的RA患者中抗Sa抗體的陽性率為42.7%,其特異性高達98.9%。抗Sa抗體陽性組患者晨僵、關節受累明顯重于陰性組,且血沉增快,X線分期中Ⅱ、Ⅲ期比例亦明顯高于陰性組,提示抗Sa抗體陽性者病程發展可能較陰性者快,癥狀較重,因此抗Sa抗體對疾病的分型可能有一定意義。研究發現,抗Sa抗體在關節滑液中存在,提示在滑膜可能發生原位免疫反應,抗Sa抗體在RA慢性損傷過程中起著潛在的作用。尤其對不典型的早期RA,抗Sa抗體可成為診斷RA的另一個指標。抗Sa抗體不與RF、抗核周因子(APF)、抗ENA抗體和抗RA33抗體等發生交叉反應。RF陽性和陰性的RA患者抗Sa抗體均可陽性,在RA的頭幾個月就可測出抗Sa抗體,且抗體滴度隨疾病活動度和治療而波動,提示抗Sa抗體的測定對RA的早期診斷、病情監測及指導治療有所幫助。
    五.抗RA33抗體
    1989年Hassfeld等首次報道抗RA33抗體,因該抗體是診斷RA較為特異的抗體,且與分子量33KD的核酸蛋白發生反應,因此定名為抗RA33抗體。其靶抗原為33KD的核酸結合蛋白,與hnRNP中的A2蛋白一致,抗原來源于HeLa細胞或Ehrilich細胞。檢測方法為免疫印跡法(IBT)。1992年Hassfeld在檢測抗RA33抗體的同時,發現部分RA患者同時存在針對36KD核酸蛋白的抗體,且后者與抗原分子量同為36KD的抗增殖細胞核抗原抗體(抗PCNA抗體)無關。抗RA33抗體與抗RA36抗體常同時出現,在免疫印跡檢測時如同時在33KD、36KD處形成兩條特征性條帶,對RA診斷更具有特異性。在各項RA早期診斷指標中,抗RA33抗體特異性最高,在RA中的陽性率為35.8%,尤其在RA早期出現。抗RA33抗體的消長與病情及用藥無關。
    六.抗RANA(Rheumatoid Arthritis Nuclear Antigen)抗體
    即抗增殖細胞核抗原抗體。因與RA關系密切,故取名為RA相關的核抗體。雖然該抗體主要存在于RA病人中,但并非RA的特異抗體。間接免疫熒光法測得其陽性率:RA40%,非RA結締組織病20%,正常人5%。抗RANA抗體效價在RA病人中明顯高于其他病人。因為RANA存在于EB病毒感染的B淋巴細胞樣的細胞株內,故有人提出該抗體出現可能同EB病毒感染有關。
    七.抗環瓜氨酸肽(Cyclic  citrullinated  peptide  CCP)抗體
    抗CCP抗體對RA的診斷敏感性為46.6%,特異性為96.6%。與APF、AKA相關,CCP是filaggrin的一段肽鏈,但不完全重疊。抗CCP抗體與HLA-DR4相關,提示抗CCP抗體陽性RA病情重、骨破壞明顯。抗CCP抗體可用ELISA法檢測。

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