精準醫學時代激素檢測大跨步發展

　　在臨床檢測中，激素檢測在內分泌疾病診療中扮演著重要角色，尤其是臨床醫生在嘗試更精準地診斷疾病時，除了影像學檢查，實驗室檢查顯得尤為重要。

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　　激素（Hormone），希臘文原意為“奮起活動”，它對機體的代謝、生長、發育、繁殖、性別、性欲和性活動等起重要的調節作用。由于激素是高度分化的內分泌細胞合成并直接分泌入血的化學信息物質，它可以通過調節各種組織細胞的代謝活動來影響人體的生理活動。在激素的檢測歷史上，放射免疫測定法(radioimmunoassays， RIAs)的使用使得人們可以在不同生理條件下測定激素水平。然而，隨著檢測技術的發展以及對人們內分泌疾病認識的深入，免疫學方法在激素檢測上的缺點也凸現出來，例如存在嗜異性或自身抗體干擾；對激素代謝的結構類似物不能區別檢測，存在交叉反應；動態線性范圍較窄，不能滿足濃度跨度范圍較大的激素檢測需求；對含量相對較低的激素檢測的靈敏度不夠；不能同時檢測多種激素等。

　　隨著質譜檢測技術不斷完善，檢測精度逐漸提升，已經有越來越多的實驗室開始使用質譜技術檢測激素類物質。回顧過去30年，質譜檢測技術在內分泌疾病領域的應用促進了幾項臨床革新，例如有效提升了先天性腎上腺皮質增生癥(congenital adrenal hyperplasia，CAH)新生兒篩查的診斷敏感性；提升了性激素低濃度值檢測的準確性；革新了嗜鉻細胞瘤/副神經節瘤(pheochromocytoma and paraganglioma，PPGL)的診斷路徑及診斷準確性等。除了在上述領域外，質譜技術也在在蛋白質、肽類激素方面、蛋白標志物的定量檢檢測方面也取得了突破性的進展。本文將對質譜技術在雄激素檢測方面進行介紹。

　　性激素分為雌激素和雄激素，雌激素包括雌酮、雌二醇和雌三醇，激素主要包括睪酮、雙氫睪酮、雄烯二酮、脫氫表雄酮和脫氫表雄酮硫酸鹽。睪酮是人體內主要的雄性激素，由男性的睪丸或女性的卵巢分泌，腎上腺亦分泌少量睪酮，具有維持肌肉強度及質量、維持骨質密度及強度、提神及提升體能等作用。目前，質譜分析方法已經被確定為雄激素測定的“金標準”，它解決了既往檢測方法低閾值低靈敏度的問題，該方法也可為睪酮提供試劑盒以及為激素水平的測定提供標準參照。目前，世界上已有三個實驗室獲得批準進行建立LC-MS的標準RMP（reference measurement procedure）測定方法測定睪酮。其中2個在歐洲，使用同位素稀釋氣相色譜-質譜法ID-GC/MS-MS，另外一個在美國NIST（National Institute of Standards and Technology）實驗室，使用基于同位素稀釋液相色譜串聯質譜ID-LC/MS-MS為常規測定方法提供試劑盒、測量參考標準的和高水準校準。據NIST報道，使用ID-LC/MS-MS分析的睪酮測定下線范圍可達到1-8 ng/dL（0.035-0.30 nM），剛好滿足婦女睪酮測定的需要。國外一些學者采用4種常規免疫測量法與LC-MS對健康受試者進行睪酮的測量結果進行比較，發現在4種常規免疫測定法與LC-MS法結果比較中，只有1種免疫測定法在測定女性的睪酮與孕酮<1mg/L與LCMS結果有相關性，而其余3種測定結果與LC/MS測出的結果均有較大差異。結果表明，常規免疫法在測定女性低濃度循環類固醇時明顯受限，而LC-MS方法更值得信賴。此外，很多學者采用改進的LC/MS-MS方法以增強睪酮測量的敏感性。例如有學者采用同位素稀釋法大大增強了LC/MS-MS的敏感性，通過配合丹酰基氯化物衍生作用，可降低雄激素間內部代謝產物干擾，從而提高檢測的靈敏性和精準性。

　　目前，臨床質譜發展火熱，很多醫院將質譜作為檢驗科標配，質譜的普及對臨床診斷準確性的提高具有重要意義。準確的測量結果可以讓臨床醫生更加準確的詮釋臨床意義，為精準治療打下基礎。