三、口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）
【定義】 在服用一定量葡萄糖后，間隔一定時間測定血糖及尿糖，觀察血糖水平及尿糖的有無，稱為糖耐量試驗。
糖耐量降低：
糖耐量增高：
【方法及評價】
1．口服糖耐量試驗：簡單、最常用。
2．靜脈糖耐量試驗：適于不能口服或患有
明顯影響葡萄糖吸收的患者。
【參考范圍】目前尚無統一標準。
一般口服葡萄糖，30min-1h血糖濃度達峰值，峰值濃度為7.8-9mmol/L，1.5-2h血糖濃度又恢復到空腹時水平，所有尿糖試驗均為陰性，為糖耐量正常。
峰值血糖濃度較正常人高，峰值時間延遲且維持較長時間；空腹血糖超過正常，尿糖陽性，為糖耐量降低。反之為糖耐量增高。
國內、美國、WHO均有不同的標準。
【臨床意義】
1．糖耐量降低
（1）糖尿病。
（2）內分泌亢進者。
（3）嚴重肝臟疾病。
（4）其它：某些感染性疾病、妊娠等。
2.糖耐量增高：多見于內分泌低下患者，
如甲低等。
四、糖化血紅蛋白A1c
糖化血紅蛋白是血紅蛋白在高血糖的作用下發生緩慢連續的非酶促糖化反應的產物，其主要形式為HbA1c，糖化水平主要決定于葡萄糖濃度。
HbA1c的測定可反映測定前6-10周內的平均血糖水平。
HbA1c可為糖尿病長期控制的良好指標，目前不主張單獨用該指標來診斷DM。
【方法及方法學評價】
主要：色譜法、電泳法、免疫法和化學法。
缺乏標準化參考方法，目前最常用的HbA1c測定方法是離子交換層析法，精密度高、重復性好且操作簡單，已被臨床廣泛采用。
國內主要采用Bio-Rex70陽離子樹脂微柱層析法，其微柱可重復使用多次。
【正常參考值】
HbA1c：6.5±1.5%；
>8.0%為HbA1c增高。
（HbA1c在總血紅蛋白中所占的比率）
【臨床意義】
1.在DM診斷上的應用。DM患者HbA1c值空腹血
糖呈正相關，但不如OGTT敏感。
2.用于DM臨床治療效果監測。可反映測定前
1-2個月的平均血糖水平。
3.可協助判斷預后。
4．其它：
HbA1c可使紅細胞粘度升高，流動性變小，變形能力明顯降低。HbA1c可造成氧合Hb的離解速度減慢，紅細胞對氧親和力增加，成為DM組織缺氧的重要因素。
五、糖化血清蛋白（果糖胺）
【測定方法及評價】
1.柱層析：
2.親和層析：
3.四唑硝基藍法（NBT）：原理是血清蛋白經非酶促糖化反應所形成的酮胺結構，在堿性環境中與NBT發生還原反應生成甲冬。比色測定，所用標準品一般為果糖胺，故又叫果糖胺試驗。
【參考范圍】NBT法1.9±0.25mmol/L
【臨床意義】
由于血清蛋白半衰期短(白蛋白19天，球蛋白18天)，因此，血清糖化蛋白可作為糖尿病患者近l-3周內血糖控制情況的監測指標，以及臨床確立治療方案的依據。
六、l,5-脫水山梨醇 (l,5-AG)
又稱l,5-脫水葡萄糖醇，或l-脫氧葡萄糖。
糖尿病患者血糖超過腎糖閾時，除排除尿糖外，尿中1,5-AG也增加，致使血中的1,5-AG含量降低，由于血中1,5-AG含量較低，故這種變化十分敏感。
【方法及方法學評價】
1．氣相色譜法、液相色普法：適于科研。
2．全自動連續注射系統—酶：自動化，
但需特殊儀器。
3．酶法：先用葡萄糖-6-磷酸酶除去葡萄糖
等干擾，然后在吡糖氧化酶作用下比色分析。
可在全自動生化分析儀上使用，較適合臨床。
精密度和準確度均好，果糖、乳糖、山梨醇等
對結果均無影響。
【參考范圍】150±46μmol／L
l型DM患者均值6-12μmol/L；
2型DM均值26-48μmol／L。
【臨床意義】
1．診斷糖尿病的合適指標。
2．可作為觀察糖尿病病程變化的指標。
1、2型糖尿病患者血中1,5-AG的水平均低于正常，其中1型更明顯。癥狀功能改善后，二者的1,5-AG表現形式不同。
七、尿中酮體定性檢查
酮體（KET）：
乙酰乙酸、β羥丁酸和丙酮組成。
酮血癥
酮尿
【測定方法及評價】
1．Lange法：亞硝基鐵氰化鈉在堿性條件下與乙酰乙酸或丙酮生成紫紅色化合物。本法對乙酰乙酸較敏感。
2．改良Rothera法（粉劑法） 原理與Lange相同。
以上兩種方法對β羥丁酸不反應。易受尿中其它物質的干擾。
3．干化學試帶法
【參考值】 陰性
【臨床意義】
1．糖尿病酮癥酸中毒 出現尿酮體檢查結
果與病情分離，因此提示分析結果時應
密切結合臨床。
2.其他 如饑餓、劇烈嘔吐或腹瀉、妊娠
劇吐。
八、胰島素（INS）
由胰島β細胞分泌的可溶性蛋白質激素，在胰島素把細胞的質膜上有能與胰島素特異結合的受體。
【測定方法】
常用的有放射免疫法、化學發光法。
【參考范圍】3-20μU/ml（空腹）
【臨床意義】血清胰島素水平，有助于DM
的分型及胰島細胞瘤的診斷。
九、C肽(C-peptide，C-P)
C肽為胰島素原轉化為胰島素時的分解產物。
對于用胰島素治療的或有胰島素抗體的患者，血中胰島素測定要受影響。而C肽與胰島素是等濃度分泌，既能反應胰島細胞的功能，又不受外源性胰島素和體內胰島素抗體的影響。
【測定方法】放射免疫法
【參考范圍】0.8-4ng/ml
【臨床意義】
主要用于糖尿病的分型及胰島細胞瘤的診斷。
十、胰島細胞抗體(ICA)
胰島細胞抗體為抗胰島β細胞所有抗體的總稱。
【測定方法】放射免疫法、間接免疫熒光法。
【參考值】陰性
【臨床意義】ICA陽性預示β細胞的自身免疫損害，只能作為糖尿病的高危指標。
另：其它自身免疫性疾病血中也可出現此抗體。
十一、胰島素抗體(IAb or A-INS)
IAb有兩種：
一種與糖尿病發病有關，在糖尿病發病之前就存在，屬自身免疫抗體；
另一種是糖尿病發生以后，使用了外源性胰島素產生的抗體。
【測定方法】
ELISA法、RIA法，國內均有試劑供應。
【參考范圍】
≦3.5%（胰島素抗體與胰島素結合的百分數）
【臨床意義】
1．用于DM的分型。1型DM組高于2型DM組；胰島素治療組IAb高于未用胰島素治療的DM組。
IAb單獨測定意義不大。
2.監測DM的療效。抗體增高，可引起夜間自發性低血糖。
十二、谷氨酸脫羧酶抗體(GAD-Ab)
GAD-Ab是糖尿病前期個體較特異的免疫指標。
【測定方法】
免疫沉淀酶活性法、放射免疫法以及
ELISA法等。
【參考范圍】陰性
【臨床意義】
①可用于1型糖尿病的預測。
②從2型糖尿病患者中鑒別遲發型1型糖尿
病。此類患者常可出現GAD-Ab的高水平，
并穩定維持，可考慮早期干預治療。
③可作為普查手段，以發現1型糖尿病的高
危人群和個體。
第三節 實驗室檢查的發展趨勢
一、發展中的糖尿病檢查新項目
（一）病因查找
糖尿病的發病因素包括：
遺傳易感性、環境因素（如肥胖）、自身免疫性疾病等。
1型糖尿病：
發現了十多個1型糖尿病易感基因位點，
兩個主要的易感基因：IDDM1、IDDM2,
IDDM1位于人類白細胞抗原（HLA）基因區； IDDM2位于人胰島素（INS）基因區。
人類白細胞抗原（HLA）是迄今已知的I型糖尿病遺傳因素中與易感性最具關系的一個。 IDDM1主要包括HLA-DR、DQ和DP三個區，分別編碼為DR、DQ和DP分子。
2型糖尿病：
目前已知四種單基因變異與2型糖尿病關系密切： 胰島素基因突變
胰島素受體基因突變
葡萄糖激酶基因突變
腺苷脫氨酶基因突變。
目前認為，大多數2型糖尿病為多基因遺傳疾病。
線粒體基因突變。
（二）并發癥的診斷
如糖尿病腎病、糖尿病視網膜病變。
糖尿病性腎病：
在伴有視網膜病變和高血壓的糖尿病人中存在有持續的蛋白尿(＞0．58／天)，但不存在其他腎病。
糖尿病腎病的實驗室指標，關鍵在早期腎損傷的診斷與監測。
1．腎小球損傷標記物
(l)尿微量白蛋白(mAlb) 糖尿病的第一個
臨床信號
(2)尿微量轉鐵蛋白(TRf) 可能比mAlb能更
早期地反映糖尿病腎小球損傷。
(3)血清γ-微球蛋白C 比肌酐更靈敏的標
記物。
(4)尿蛋白譜 包括白蛋白、IgG、α2-巨
球蛋白和 κ、λ輕鏈等，是一組可用免
疫化學自動分析，在短時間內測定的具
備不同分子量的尿蛋白組分。
(5)Ⅳ型膠原、纖維粘連蛋白、板層素
2、腎小管標記蛋白
分為兩類：
l腎小管上皮細胞的各種酶(通稱為尿酶)
和從各段腎小管脫落的抗原；
l低分子量蛋白。
（l）酶：N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、β-半乳糖苷酶、亮氨酸氨基肽酶等。把mAlb和NAG作為早期發現和監控糖尿病腎病的常規指標。
（2）低分子量蛋白：分子量低于50萬。
包括β2mG等。但其有缺點。
α1mG穩定性比β2mG好，可減少測定誤差，提高準確度，重復性好。
因此目前α1mG逐漸取代β2mG，成為低分子蛋白的首選指標。
視黃醇結合蛋白(RBP)優于β2mG.
（3）腎小管固有抗原
近年見于文獻報告的有腎小管細胞刷狀緣抗原BB50、BBA等。另外還有Tammm-Horsfall糖蛋白，β2糖蛋白 l(尿載脂蛋白 H)等
二、檢查方法學的進展
糖尿病的實驗室檢查大致可從三方面進行：
·致病、遺傳基因的檢測
·胰島功能的檢測
·血糖水平的檢測
糖尿病與遺傳的關系是當前研究的熱點。1．熒光原位雜交（fluorescence in situ hybridization, FISH）：是近年來染色體分析的最顯著進步。用生物素或毛地黃毒甙標記探針DNA，經與待檢DNA共同變性復員后，標記探針DNA與染色體DNA形成新的雙股螺旋，在加入熒光標記的抗生物素或毛地黃毒甙的抗體后，熒光顯微鏡下觀察，即可對染色體構造的異常做出判斷。
2．PCR
3．實時定量PCR
便攜式血糖測定儀：
生物傳感技術（酶反應中化學信號的改變，經傳感器轉變為物理信號），末梢血、操作簡便。
現在無創傷性的血糖測定儀已誕生。如何確保測定結果的準確性？