原理
利用碘乙酸對糖酵解過程中3-磷酸甘油醛脫氫酶的抑制作用，使3-磷激甘油醛不再向前變化而積累。硫酸肼作為穩定劑，用來保護3-磷酸甘油醛使不自發分解。然后用2，4-二硝基苯肼與3-磷酸甘油醛在堿懷條件下形成2，4-二硝基苯肼-丙糖的棕色復合物，其棕色程度與3-磷酸甘油醛含量成正比。
操作方法
1、取小燒杯3只，分別加入新鮮酵母0.3克，并按下表分別加入各試劑 ，混勻。
2、將各杯混合物分別倒入編號相同的發酵管內，放入37℃保溫1.5小時，觀察發酵管產生氣泡的量有何不同。
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杯號 |
5%葡萄糖（ml） |
10%三氯醋酸 （ml） |
碘乙酸 （ml） |
硫酸肼 （ml） |
發酵時 氣泡多少 |
|
1 |
10 |
2 |
1 |
1 |
|
|
2 |
10 |
- |
1 |
1 |
|
|
3 |
10 |
- |
- |
- |
3、把發酵管中發酵液傾倒入同號小燒杯中并在2和3號杯中按下表補加各試劑，搖勻放10分鐘后和第一只燒杯中內容物一起分別過濾，取濾液進行測定。
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杯號 |
10%三氯醋酸（ml） |
碘乙酸（ml） |
硫酸肼（ml） |
|
2 |
2 |
- |
- |
|
3 |
2 |
1 |
1 |
4、取三個試管，分別加入上述濾液0.5毫升，并按下表加入試劑和處理。
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管號 |
濾液 （ml） |
0.75N NaOH |
室溫放置10分鐘 |
2，4-二硝基苯肼 |
38℃水浴保溫10分鐘 |
0.75N NaOH |
觀察結果 |
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1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
3.5 |
|||
|
2 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
3.5 |
|||
|
3 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
3.5 |
試劑和器材
一、試劑
（1）2，4-二硝基苯肼：0.1克2，4-二硝基苯肼溶于100毫升2N 鹽酸溶液中，貯于棕色瓶備用。
（2）0.56M硫酸肼溶液：稱取7.28克硫酸肼溶于50毫升水中，這時不易全部溶解，當加入NaOH使PH達7.4時則完全溶解。此液也可用水合肼溶液配制，可按其分子濃度稀釋至0.56M，此時溶液呈堿性，可用濃硫酸調PH 達7.4即可。
（3）5%葡萄糖溶液 （4）10%三氯乙酸
（5）0.75N NaOH溶液 （6）0.002M碘乙酸
（7）酵母
二、器材
（1） 試管（1.5×15cm） （2）吸量管（1、2、10ml）
（3）恒溫水浴 （4）燒杯（50ml）
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